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donnafeng

金虫 (小有名气)

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[求助] 疏水性蛋白表达纯化问题

在做一个酶蛋白表达纯化这个蛋白疏水性很强活性形式可能是二聚体或者四聚体形式在表达过程中非常容易生成包涵体采用0.1mM IPTG 16度过夜诱导有部分可溶性表达表达量还是不高过ni柱纯化以后透析过程中非常容易产生沉淀并且蛋白等电点预测在6.75 和ni柱操作时的的ph比较接近看到万金油buffer的帖子后尝试用5%甘油保护透析时沉淀较少但是甘油干扰酶活的测定想请教
1 有没有别的跟甘油效果差不多的保护剂可以用
2 想尝试在培养基添加1%葡萄糖去除乳糖的影响不知道葡萄糖要不要单独灭菌还是和培养基一起灭聚体怎么操作

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1楼 2012-02-17 11:09:11

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donnafeng

金虫 (小有名气)

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专业: 食品科学基础

有没有和甘油效果差不多的保护剂啊推荐一下嘛

3楼2012-02-21 10:32:36

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