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海阔天空8158

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+6, MolEPI+1): 很热心帮忙,授予EPI! 2012-01-18 19:07:48
引用回帖:
7楼: Originally posted by bffgbgff at 2012-01-16 15:50:19:
多谢意见。我1ugRNA逆转录后,我用nanodrop2000测过单链cDNA浓度。和其他样本基本无差别,PCR时,模板稀释了10倍!1,2,3,4,GAPDH的CT值都是18左右。另外引物稀释过一倍,还是这个样子!打算重新收集一批RNA再重 ...

按照现在的实验条件和你现在的描述,由于没有足够的模板,引物因此没有经过消耗。这样的话,如果引物能够形成二聚体的话,会很大比例的形成二聚体。

关于引物二聚体的形成难易程度,可以在PRIMER PREMIER 5.0中进行验证。

或者,可以通过文献查找的方法,合成比较成熟的引物。

如果时间允许的话,这些都可以试试。

祝实验顺利。
天行健,君子以自强不息;地势坤,君子以厚德载物。
8楼2012-01-16 16:40:52
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