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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 溶解曲线的问题
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bffgbgff

新虫 (小有名气)

[求助] 溶解曲线的问题

我做的realtime-PCR，1-4号模板P其他的基因都很好，唯独这个基因溶解曲线不好，相同的引物在不同的模板间溶解曲线不一样。是为什么呢？见图。
不知道哪位前辈遇到过这个问题！
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1楼2012-01-13 15:50:32
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+1, 专家考核): make 2012-01-18 20:42:45
引用回帖:
8楼: Originally posted by 海阔天空8158 at 2012-01-16 16:40:52:
按照现在的实验条件和你现在的描述，由于没有足够的模板，引物因此没有经过消耗。这样的话，如果引物能够形成二聚体的话，会很大比例的形成二聚体。

关于引物二聚体的形成难易程度，可以在PRIMER PREMIER 5.0 ...

有一定道理。楼主可以看看扩增曲线，看看PCR反应有没有到达平台期。如果模板浓度低的样品没有到达平台期，说明PCR体系还没消耗尽，那可能就是 海阔天空8158 说的情况。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2012-01-18 19:07:16
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