应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 怎样鉴定毕赤（GS115）重组菌是胞内还是胞外表达
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 2155  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

houhoujiayou

银虫 (小有名气)

[交流] 怎样鉴定毕赤（GS115）重组菌是胞内还是胞外表达

我最近在做毕赤酵母的表达。一直以为只要在GS115中表达的都是分泌型，但是看了一下好象不是。请教这方面的高手，怎么鉴定？我是直接用EcoR I 单酶切位点插入pPic9k上的多克隆位点的，做了MM/MD平板鉴定，重组子是甲醇利用缓慢型的，可是做过两次发酵了，取的上清跑蛋白电泳好像是比空白多了一个条带（条带都比较浅，所以不确定）可是测定酶活时是没有酶活的。请问大家都是怎么做的？比较急，希望多出建议，谢谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-12-29 15:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-12-29 17:32:25
houhoujiayou(金币+5): 谢谢你的回答，我已经用超滤管浓缩了 2012-01-02 13:56:01
是否是分泌型表达，是看你用的载体，不是看宿主。
pPic9k是分泌型表达载体，因此你的蛋白是分泌到胞外地。
没有酶活也可能是你蛋白含量较少，做浓缩吧，利用超滤管就行。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-12-29 16:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

austin2008

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励交流！ 2011-12-30 22:47:15
houhoujiayou(金币+1): 2012-01-02 14:11:26
是否是分泌型表达，是看你用的载体，而不是看宿主。你用的载体是分泌表达载体，没表达的原因很多，建议你好好看看毕赤酵母表达手册，先把基本问题搞清楚
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-12-30 19:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuoyue911

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
4楼2011-12-31 02:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+1): 热心 2011-12-31 14:37:26
wanhscn(金币+1): 热心 2011-12-31 14:37:35
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4002082，写的很详细，自己下载来看吧
赞一下(3人) 回复此楼
5楼2011-12-31 11:11:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foresthaust

金虫 (小有名气)
学习中
回复此楼
6楼2012-03-17 22:04:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 houhoujiayou 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行 +11 lllllos 2026-03-30 11/550 2026-03-30 21:19 by 研究僧导导
[考研] 求收留 +6 1943443204 2026-03-28 6/300 2026-03-30 20:37 by dick_runner
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +12 辰沐5211314 2026-03-26 12/600 2026-03-30 19:28 by Wang200018
[考研] 考研调剂 +5 Sanmu-124 2026-03-26 5/250 2026-03-30 13:36 by chemdavid
[考研] 375求调剂 +6 雨夏整夜 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:21 by herarysara
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[考研] 考研调剂 +7 小蜡新笔 2026-03-29 7/350 2026-03-29 19:00 by 学员8dgXkO
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭