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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 怎样鉴定毕赤（GS115）重组菌是胞内还是胞外表达
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houhoujiayou

银虫 (小有名气)

[交流] 怎样鉴定毕赤（GS115）重组菌是胞内还是胞外表达

我最近在做毕赤酵母的表达。一直以为只要在GS115中表达的都是分泌型，但是看了一下好象不是。请教这方面的高手，怎么鉴定？我是直接用EcoR I 单酶切位点插入pPic9k上的多克隆位点的，做了MM/MD平板鉴定，重组子是甲醇利用缓慢型的，可是做过两次发酵了，取的上清跑蛋白电泳好像是比空白多了一个条带（条带都比较浅，所以不确定）可是测定酶活时是没有酶活的。请问大家都是怎么做的？比较急，希望多出建议，谢谢
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1楼 2011-12-29 15:52:06
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