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houhoujiayou

银虫 (小有名气)


[交流] 怎样鉴定毕赤(GS115)重组菌是胞内还是胞外表达

我最近在做毕赤酵母的表达。一直以为只要在GS115中表达的都是分泌型,但是看了一下好象不是。请教这方面的高手,怎么鉴定?我是直接用EcoR I 单酶切位点插入pPic9k上的多克隆位点的,做了MM/MD平板鉴定,重组子是甲醇利用缓慢型的,可是做过两次发酵了,取的上清跑蛋白电泳好像是比空白多了一个条带(条带都比较浅,所以不确定)可是测定酶活时是没有酶活的。请问大家都是怎么做的?比较急,希望多出建议,谢谢
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foresthaust

金虫 (小有名气)


学习中
6楼2012-03-17 22:04:52
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