24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1144  |  回复: 4

mxlo.o

金虫 (正式写手)

[求助] RNA提取的问题么

从真菌中扩增一个基因,全长3kb左右,mRNA长度2kb左右;自己设计的引物以DNA为模板能够扩增出来,但是以cDNA为模板不能够能够扩增出来。提取的RNA扩另一个基因(819bp)能够扩增出来,请问各位高手,原因出在哪呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 有道理! 2011-12-19 22:27:43
mxlo.o(金币+2): ★★★很有帮助 2011-12-23 16:21:30
反转超过2K效率下降哇,模板太少,建议楼主做二次PCR
2楼2011-12-19 22:17:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxlo.o

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by shaquila at 2011-12-19 22:17:13:
反转超过2K效率下降哇,模板太少,建议楼主做二次PCR

扩增不出来,怎么做二次PCR?
3楼2011-12-21 08:58:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pmay

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+1): 我相信楼主应该不会犯这种错误! 2011-12-21 10:23:45
mxlo.o(金币+2): 有帮助 2011-12-23 16:21:43
引物设计的有问题吗?是不是跨内含子的?
4楼2011-12-21 09:45:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励热心应助! 2011-12-21 18:35:55
引用回帖:
3楼: Originally posted by mxlo.o at 2011-12-21 08:58:14:
扩增不出来,怎么做二次PCR?

看不见未必扩增不出来,根据自己经验,如果体系没有问题,三十五个循环能把低于10ag的纯模板成功扩增,而以10ng 反转产物为模板,即使模板不足总量的亿份之一,也有可能通过二次PCR做出来。除第一次非扩增体系非常不合适,不然二次还是很有可能出来
5楼2011-12-21 11:33:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mxlo.o 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602调剂 初试总分335 +8 19123253302 2026-04-05 8/400 2026-04-05 20:44 by 南航~万老师
[考研] 301求调剂 +5 细胞相关蛋白 2026-04-02 9/450 2026-04-05 20:14 by lys0704
[考研] 复试调剂 +8 春日来信- 2026-04-03 8/400 2026-04-05 18:58 by 蓝云思雨
[考研] 工科08-机械专硕-求调剂 +3 雷欧飞踢 2026-04-02 3/150 2026-04-05 18:49 by 蓝云思雨
[考研] 08专硕275调剂 +5 AaAa7420 2026-04-05 5/250 2026-04-05 18:01 by jkddd
[考研] 一志愿北京化工大学,初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 材料调剂 +15 一样YWY 2026-04-01 15/750 2026-04-04 22:23 by hemengdong
[考研] 278求调剂 +3 依旧! 2026-04-02 4/200 2026-04-04 20:27 by 蓝云思雨
[考研] 277工科求调剂 +7 1915668 2026-04-04 7/350 2026-04-04 17:21 by 啊俊!
[考研] 291求调剂 +4 迷蒙木木 2026-04-01 5/250 2026-04-04 15:59 by sihailian3
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 考研求调剂 +3 木心想继续深造 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:56 by 啵啵啵0119
[考研] 311求调剂 +11 勇敢的小吴 2026-04-02 11/550 2026-04-03 21:46 by qlm5820
[考研] 320求调剂 +5 振—TZ 2026-04-02 5/250 2026-04-03 14:42 by fxue1114
[考研] 321求调剂 +17 y-yh 2026-04-01 20/1000 2026-04-03 12:57 by y-yh
[考研] 求调剂22408 288分 +5 new382 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:13 by 醉在风里
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 【求调剂】新能源材料本科,一志愿211,初试321 +6 求调剂学校, 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
信息提示
请填处理意见