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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请高手看看我的PCR图片
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doudouxiong

铜虫 (小有名气)

[求助] 请高手看看我的PCR图片 已有3人参与

DNA是我自己手提的，Marker最大的条带是1500bp的，PCR后的产物检测中没有检测到扩增的条带，总是检测出类似于基因组的片段，引物是特异性的，目的是扩增基因的一段，怎么会这样呢？
注：引物的退火温度是58.6，PCR扩增的时候是55°
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1楼 2011-12-19 20:37:27
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zjzws1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+3): 鼓励新虫友热情的应助，3金币奖励！ 2011-12-19 22:30:29
doudouxiong(金币+5): 2011-12-20 10:04:57
首先摸下梯度，如果梯度出了，你没扩出来那就是你模板的问题，如果摸梯度就什么都没出可以考虑如下思路：
重新设计引物，考虑目的片段长度换更适合的酶、
另外您说“注：引物的退火温度是58.6，PCR扩增的时候是55°”是啥意思？
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3楼2011-12-19 21:28:45
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5xiaosh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
doudouxiong(金币+1): 共勉共勉 2011-12-20 10:07:03
也在做pcr  什么都没p出来的低手沉痛飘过
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2楼2011-12-19 20:57:52
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
doudouxiong(金币+4): 2011-12-20 10:06:32
PCR条件还是不合适，换退火温度试试，还没条带就重设计引物。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2011-12-20 01:04:17
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 5xiaosh at 2011-12-19 20:57:52:
也在做pcr  什么都没p出来的低手沉痛飘过

像这种水帖，或者说同情帖，请不要选择“回帖应助”
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5楼2011-12-20 09:04:54
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