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doudouxiong

铜虫 (小有名气)

[求助] 请高手看看我的PCR图片已有3人参与

DNA是我自己手提的,Marker最大的条带是1500bp的,PCR后的产物检测中没有检测到扩增的条带,总是检测出类似于基因组的片段,引物是特异性的,目的是扩增基因的一段,怎么会这样呢?
注:引物的退火温度是58.6,PCR扩增的时候是55°
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zjzws1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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wanhscn(金币+3): 鼓励新虫友热情的应助,3金币奖励! 2011-12-19 22:30:29
doudouxiong(金币+5): 2011-12-20 10:04:57
首先摸下梯度,如果梯度出了,你没扩出来那就是你模板的问题,如果摸梯度就什么都没出可以考虑如下思路:
重新设计引物,考虑目的片段长度换更适合的酶、
另外您说“注:引物的退火温度是58.6,PCR扩增的时候是55°”是啥意思?
3楼2011-12-19 21:28:45
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