应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA 条带 和 OD值
51/1返回列表
查看: 3198  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

5xiaosh

银虫 (小有名气)

[求助] DNA 条带 和 OD值

继前面RNA条带和OD值哪个更重要的帖子，我也提一下自己最近实验遇到的问题，请大侠们看看。我是第一次做，遇到这样的问题，不知该怎么解释？

最近从新生裸鼠组织里提 rna（用的试剂盒）  测浓度60ng/ul 测OD值A260/A280=2.0  我没有跑胶看 分装后冻到-80的冰箱里去了   过了不到1周  我今天取了一管 测浓度50ng/ul
  A260/A280=2.15   然后 我用试剂盒（takara）做逆转录 扩cdna   反应后测浓度869ng/ul，OD值A260/A280=2.06， 然后用该cdna模板做pcr（10ul反应体系，cDNA稀释了10倍，加了2ul），设计了4对引物，做了4管， 同样反应结束后测DNA浓度 500ng/ul OD值A60/A280=1.8多  可是跑胶 （我加了7ul 扩增样品，2.5ulbuffer） 却什么都没跑出来 很干净  。为什么测浓度，测OD值都有，却没有条带呢 ？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-17 17:59:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

5xiaosh: 回帖置顶 2011-12-20 14:32:56
5xiaosh(金币+2): 我在逆转录反应前测了一下ep管里的反应液OD，500多ng/ul。现在发现是cDNA没有扩出来，因为我没加Rnasin。O(∩_∩)~ 2011-12-20 14:35:59
你扩完的cDNA怎么能测浓度呢？如果你是直接测浓度里面一大堆乱七八糟的东西，测出来的浓度完全没有可信度。
你做PCR的时候加一个阳性对照（actin什么的），你只用你自己设计的四个引物做很难说明问题，可能本来PCR体系或引物就有问题。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
9楼2011-12-19 10:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

bready

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
5xiaosh(金币+1): 嗯，谢谢。 2011-12-20 14:30:29
很有可能是你的总RNA已经降解了！提取完还是要跑胶检测的！
赞一下 回复此楼
加油
2楼2011-12-18 00:28:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by bready at 2011-12-18 00:28:15:
很有可能是你的总RNA已经降解了！提取完还是要跑胶检测的！

谢谢您 RNA电泳  跟DNA 电泳一样吗 ？  有什么特别注意的吗 ？
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-18 12:19:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bready

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

浓度不一样，其他的没有区别，还有你提取的总RNA如果要经常用，要分装！不要经常冻溶！
赞一下 回复此楼
加油
4楼2011-12-18 13:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭