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liu-xj10

木虫 (小有名气)

[求助] 【求助】材料上的细胞SEM观察

最近要做材料上的细胞的SEM观察,我们组之前都是戊二醛固定后酒精脱水然后自然风干就去看电镜了,不过我看别人都有干燥的过程,我想用叔丁醇冷冻干燥,但是在抽真空的过程对细胞有损伤么?会不会把贴附的细胞抽下来呢?应该不会吧。。。大家有这方面经验么?
另外我想问一下不透明的材料上的细胞经染色后能用倒置光学显微镜看么?效果如何呢?
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Florita

金虫 (正式写手)

没用SEM看过细胞,但是用SEM看过胶原纤维组织。一开始时没有冻干,没有喷金,直接抽低真空。放大到5000倍后,纤维根本看不清楚;后来冻干后再去看,还是没有明显的纤维形态。。。在这个过程中我也观察到表面的细胞了,但是因为我不是生物专业的,没没有专门看细胞,不知道有木有损坏。。。希望这些经验可以帮助到你~
10楼2012-04-01 09:23:41
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红舟流星

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【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-12-16 23:18:36
liu-xj10(金币+5): 谢谢交流~ 2011-12-20 13:54:54
SEM不是要喷晶吗?
那个不伤害细胞?
冻干是升华,不怎么伤害细胞的
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
2楼2011-12-15 23:59:59
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liu-xj10

木虫 (小有名气)

引用回帖:
楼: Originally posted by 红舟流星 at 2011-12-15 23:59:59:
SEM不是要喷晶吗?
那个不伤害细胞?
冻干是升华,不怎么伤害细胞的

谢谢
我是怕抽真空的时候会对细胞有影响,到达真空度后应该没事了。他们之前做扫描都是自然干燥的,我还是想用叔丁醇用冻干的方法做。
3楼2011-12-16 00:06:01
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红舟流星

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【答案】应助回帖

★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-12-16 23:18:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by liu-xj10 at 2011-12-16 00:06:01:
谢谢
我是怕抽真空的时候会对细胞有影响,到达真空度后应该没事了。他们之前做扫描都是自然干燥的,我还是想用叔丁醇用冻干的方法做。

试试材料浸没在溶剂中然后液氮,然后冻干
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
4楼2011-12-16 00:39:26
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