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z_yui

金虫 (初入文坛)

[求助] 筛解磷菌的透明圈实验

如题,培养基中要加入不溶的磷酸钙,可是做成平板后磷酸钙都沉在下面了,接的菌在平板最上面,分解不到沉淀在下面的磷酸钙也就没有透明圈。查了几篇文献都没细写这个问题,哪位大侠做过这方面的实验,求指导!
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plumplumgxc

金虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-15 18:18:16:
你的意思是第一层找平平板。然后倒很薄的磷酸盐培养基。但是lz说的是磷酸盐不溶解的问题。

我考虑,还是混合菌倾注培养基最好,

磷酸盐不溶解只要淹没细一些 混在培养基中,使培养基变浑浊,摇匀后倒平板基本没什么沉淀了,我们就是这样做的
混合均倾注应该也不错,但菌的浓度不好控制要提前摸一下
科研这条道不好走啊。。。
12楼2011-12-16 10:51:00
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

z_yui(金币+4): 2011-12-15 22:25:14
引用回帖:
9楼: Originally posted by plumplumgxc at 2011-12-15 16:21:10:
个人意见:下层只是琼脂层,不加营养,上层铺磷酸盐培养基(注意摇匀)薄薄一层即可,再接菌

你的意思是第一层找平平板。然后倒很薄的磷酸盐培养基。但是lz说的是磷酸盐不溶解的问题。

我考虑,还是混合菌倾注培养基最好,
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
10楼2011-12-15 18:18:16
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zzz888666

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以少倒些培养基,平板搞薄一些
11楼2011-12-15 20:43:33
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普通回帖

zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以等培养基降温,然后混合菌液,倾注培养基
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
2楼2011-12-13 21:31:11
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暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-12-16 14:35:38
最简单的方式就是倾注培养法。
或者可以将培养基的pH降点(如果培养的菌允许的话)酸性条件下磷酸钙会溶解~~或者将细胞固定化,来做。
3楼2011-12-13 23:05:09
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z_yui

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-13 21:31:11:
你可以等培养基降温,然后混合菌液,倾注培养基

我的目的是测量菌落的直径和透明圈的直径再进行计算,混在一起的话,菌生长的位置不固定也不好测量了啊,还有别的方法吗?
4楼2011-12-14 21:53:39
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z_yui

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 暧醉殇 at 2011-12-13 23:05:09:
最简单的方式就是倾注培养法。
或者可以将培养基的pH降点(如果培养的菌允许的话)酸性条件下磷酸钙会溶解~~或者将细胞固定化,来做。

我想要筛选能将固体磷酸钙分解成水溶性磷的解磷菌,所以,如果先用酸将磷酸钙溶解的话,接种就没有意义了。还有别的方法吗?您说的细胞固定化我没接触过,是怎么做呢?
5楼2011-12-14 21:58:32
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慈铠戟_

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
- -我都是要用的时候,拼命的摇匀培养基,然后倒平板,我也见过有书上说可以先配无磷培养基,倒平板,最后才加入含磷物。不过具体操作不是很清楚
6楼2011-12-15 11:02:07
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by z_yui at 2011-12-14 21:53:39:
我的目的是测量菌落的直径和透明圈的直径再进行计算,混在一起的话,菌生长的位置不固定也不好测量了啊,还有别的方法吗?

我觉得你可以使用双层平板。第一层使用你菌合适的营养培养基,然后涂布菌种。

第二步,在上面倒上一次磷酸盐培养基。

要注意温度。不要烫死菌体

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
7楼2011-12-15 12:08:36
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z_yui

金虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-15 12:08:36:
我觉得你可以使用双层平板。第一层使用你菌合适的营养培养基,然后涂布菌种。

第二步,在上面倒上一次磷酸盐培养基。

要注意温度。不要烫死菌体

倒上面那层平板的时候菌还是会被冲散得到处都是,还是不方便测菌落和透明圈的直径啊……
8楼2011-12-15 12:52:32
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plumplumgxc

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
z_yui(金币+1): 2011-12-15 22:25:32
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-15 12:08:36:
我觉得你可以使用双层平板。第一层使用你菌合适的营养培养基,然后涂布菌种。

第二步,在上面倒上一次磷酸盐培养基。

要注意温度。不要烫死菌体

个人意见:下层只是琼脂层,不加营养,上层铺磷酸盐培养基(注意摇匀)薄薄一层即可,再接菌
科研这条道不好走啊。。。
9楼2011-12-15 16:21:10
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