24小时热门版块排行榜    

查看: 1387  |  回复: 6
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 ashelychan 的 1 个金币

ashelychan

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】发酵液复筛实验中发酵液总是没有活性怎么办已有3人参与

我从土壤里筛选到了一株芽孢杆菌,平板对峙实验结果显示具有较好的拮抗活性。但是,当我把它拿去发酵培养,取其发酵液上清(上清液经过微膜过滤除菌)进行复筛实验时,发现没有显示出任何拮抗活性,这是怎么回事?该怎么解决?
附:平板对峙实验采用周对峙,对峙温度是25度。发酵液复筛实验采用打孔法或者牛津杯法,复筛温度也是25度。发酵条件为30度、220rpm,培养48h,种龄为12-24小时,发酵液配方为LB液体培养基、牛肉膏蛋白胨液体培养基或者马铃薯葡萄糖培养基。文献上这些方法都能有活性。为什么我的总是没有活性,该如何解决?另外,拮抗菌转接多代会不会也导致没有拮抗活性啊?我的发酵用的菌种好像转接了很多代了。
    请各位大侠指点迷津。谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我奋斗,所以我精彩;我快乐,所以我精彩;我自信,所以我精彩
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

85715623

木虫 (正式写手)

ashelychan(金币+1): 2010-04-27 21:31
ashelychan(金币+1):谢谢您的建议,让我茅塞顿开。不过我想知道具体的浓缩方法,请指点一二。 2010-05-05 08:57:08
传代多次的话会导致退化。还要考虑产物浓度问题,你接种菌体的话会持续产生产物,而用牛津杯则含量较低,应考虑浓缩。
2楼2010-04-27 08:16:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashelychan

木虫 (小有名气)

可是,现在我不知道我的培养基能不能让它产生活性物质,这时候我应该是先做发酵液拮抗实验而不是先浓缩吧?采用什么方法进行发酵液拮抗实验才能有活性显示?怎样进行浓缩啊?呵呵,刚入行,不懂的地方较多,请多多指点,谢谢。
我奋斗,所以我精彩;我快乐,所以我精彩;我自信,所以我精彩
3楼2010-04-27 21:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiuzhenlu

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
plantaqp(金币+3): 2010-05-01 01:41
楼主您好,对于微生物固体培养和液体培养很可能产生不同的物质,所以你说平板培养有活性液体培养无活性是正常的现象。建议你将固体培养的成分与液体培养的成分分别做个tlc之类的物质鉴定,看看物质是不是一样。
4楼2010-04-30 23:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashelychan

木虫 (小有名气)

不好意思,请问什么是tlc?呵呵呵,请别见笑,本人不懂之处颇多。还有,你所说的固体培养的成分与液体培养的成分是指拮抗菌在这两种情况下所产生的活性物质吗?是将这两种活性物质拿去做tlc吗?
我奋斗,所以我精彩;我快乐,所以我精彩;我自信,所以我精彩
5楼2010-05-05 08:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gswyhq

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
567220楼: Originally posted by ashelychan at 2010-05-05 08:58:31
不好意思,请问什么是tlc?呵呵呵,请别见笑,本人不懂之处颇多。还有,你所说的固体培养的成分与液体培养的成分是指拮抗菌在这两种情况下所产生的活性物质吗?是将这两种活性物质拿去做tlc吗?

现在回答你,估计你早已毕业了,有点迟了。但为了后来人的交流学习,还是说两句。
tlc:薄层色谱法(Thin-Layer Chromatography);个人认为:“qiuzhenlu ”大侠的意思是通过tlc比较固体发酵和液体发酵成分差异,说的“成分”是指所有发酵完后所有的物质,而不仅仅是指活性抑菌物质。
6楼2012-07-02 10:33:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bamyl

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
发酵液离心后,先确定是上清液还是菌体有抑菌性,如果是上清液可以离心后加个样看有没有抑菌圈,或者80℃水浴除菌,过膜有可能会把抑菌物质除去。好的菌种先保存好。
7楼2014-04-09 15:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ashelychan 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] Scientific reports 投稿 +3 chencome12 2024-06-02 3/150 2024-06-02 20:28 by Lynn212
[教师之家] 职能部门工作人员态度不好是普遍的吗?怎么让他们态度好一些? +5 河西夜郎 2024-06-01 5/250 2024-06-02 19:19 by Quakerbird
[教师之家] 选择 +8 459582015 2024-05-31 11/550 2024-06-02 18:30 by auvauv
[硕博家园] 各位同学能否分享一下实验室的学生劳务发放标准呀? +19 ma3252788 2024-05-30 19/950 2024-06-02 18:15 by Lcy6666
[基金申请] 为什么美国要封锁华为而不封锁丘C同呢? +6 zju2000 2024-06-02 7/350 2024-06-02 16:12 by sxjc500
[论文投稿] 没收到邮件 10+4 荣小撇 2024-05-31 9/450 2024-06-02 13:25 by bobvan
[硕博家园] 每到中夜,情难自抑 +34 sioc-sunj 2024-05-28 58/2900 2024-06-02 02:53 by csyky2007
[考博] 24年博士招生 +8 abinit432 2024-05-27 10/500 2024-06-01 17:38 by czp97
[基金申请] B口人才项目 +9 WOWO159357 2024-05-29 19/950 2024-06-01 14:24 by linxuhuizj
[考博] 申博求助?本硕双非一篇三区和四区去985工科非天坑专业有没有希望? +4 LYS1200 2024-05-29 6/300 2024-06-01 08:50 by 学术渣渣神
[论文投稿] 纠结选哪一个期刊,电化学领域 50+8 Freya163 2024-05-28 10/500 2024-05-31 15:09 by wzykobe
[文学芳草园] 对对子啊 +5 天若孤独 2024-05-29 7/350 2024-05-31 09:00 by wjykycg
[硕博家园] 又想换工作 +15 brightmj 2024-05-27 20/1000 2024-05-29 23:25 by zyqchem
[基金申请] 信息学部函评结束了吗? +6 ducan21 2024-05-28 7/350 2024-05-29 12:10 by WORLD0256
[论文投稿] 真急着毕业,CPB主编终审17天了,邮件催稿了两次,就是一点动静没有 5+3 kkkk夏 2024-05-28 6/300 2024-05-29 11:18 by hitsdu
[论文投稿] 核心初审被拒,理由是“选题的意义不明确,文章写得不像是科技论文”,怎么改 5+3 工藤雷花樱 2024-05-27 8/400 2024-05-29 10:09 by topedit
[基金申请] 如果您是国自然评审专家 +3 丁香园账户 2024-05-28 3/150 2024-05-29 06:44 by gaohui8888
[基金申请] E05青基有几个评审 +4 KYXY123 2024-05-28 4/200 2024-05-28 19:25 by popt2t
[基金申请] E10开始送了,希望有好运 +5 sail 2024-05-27 5/250 2024-05-28 18:36 by 芝小芝
[硕博家园] 课题做到一半担心做不出来怎么办 +4 mkpooooo 2024-05-27 7/350 2024-05-27 11:56 by kanmiaolucky
信息提示
请填处理意见