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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 筛解磷菌的透明圈实验
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z_yui

金虫 (初入文坛)

[求助] 筛解磷菌的透明圈实验

如题，培养基中要加入不溶的磷酸钙，可是做成平板后磷酸钙都沉在下面了，接的菌在平板最上面，分解不到沉淀在下面的磷酸钙也就没有透明圈。查了几篇文献都没细写这个问题，哪位大侠做过这方面的实验，求指导！
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1楼2011-12-13 21:05:01
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

plumplumgxc

金虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-15 18:18:16:
你的意思是第一层找平平板。然后倒很薄的磷酸盐培养基。但是lz说的是磷酸盐不溶解的问题。

我考虑，还是混合菌倾注培养基最好，

磷酸盐不溶解只要淹没细一些 混在培养基中，使培养基变浑浊，摇匀后倒平板基本没什么沉淀了，我们就是这样做的
混合均倾注应该也不错，但菌的浓度不好控制要提前摸一下
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科研这条道不好走啊。。。
12楼2011-12-16 10:51:00
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

z_yui(金币+4): 2011-12-15 22:25:14
引用回帖:
9楼: Originally posted by plumplumgxc at 2011-12-15 16:21:10:
个人意见：下层只是琼脂层，不加营养，上层铺磷酸盐培养基（注意摇匀）薄薄一层即可，再接菌

你的意思是第一层找平平板。然后倒很薄的磷酸盐培养基。但是lz说的是磷酸盐不溶解的问题。

我考虑，还是混合菌倾注培养基最好，
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
10楼2011-12-15 18:18:16
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zzz888666

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以少倒些培养基，平板搞薄一些
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11楼2011-12-15 20:43:33
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普通回帖

zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以等培养基降温，然后混合菌液，倾注培养基
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
2楼2011-12-13 21:31:11
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暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-12-16 14:35:38
最简单的方式就是倾注培养法。
或者可以将培养基的pH降点（如果培养的菌允许的话）酸性条件下磷酸钙会溶解~~或者将细胞固定化，来做。
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3楼2011-12-13 23:05:09
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z_yui

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-13 21:31:11:
你可以等培养基降温，然后混合菌液，倾注培养基

我的目的是测量菌落的直径和透明圈的直径再进行计算，混在一起的话，菌生长的位置不固定也不好测量了啊，还有别的方法吗？
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4楼2011-12-14 21:53:39
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z_yui

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 暧醉殇 at 2011-12-13 23:05:09:
最简单的方式就是倾注培养法。
或者可以将培养基的pH降点（如果培养的菌允许的话）酸性条件下磷酸钙会溶解~~或者将细胞固定化，来做。

我想要筛选能将固体磷酸钙分解成水溶性磷的解磷菌，所以，如果先用酸将磷酸钙溶解的话，接种就没有意义了。还有别的方法吗？您说的细胞固定化我没接触过，是怎么做呢？
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5楼2011-12-14 21:58:32
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慈铠戟_

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
- -我都是要用的时候，拼命的摇匀培养基，然后倒平板，我也见过有书上说可以先配无磷培养基，倒平板，最后才加入含磷物。不过具体操作不是很清楚
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6楼2011-12-15 11:02:07
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by z_yui at 2011-12-14 21:53:39:
我的目的是测量菌落的直径和透明圈的直径再进行计算，混在一起的话，菌生长的位置不固定也不好测量了啊，还有别的方法吗？

我觉得你可以使用双层平板。第一层使用你菌合适的营养培养基，然后涂布菌种。

第二步，在上面倒上一次磷酸盐培养基。

要注意温度。不要烫死菌体
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z_yui
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
7楼2011-12-15 12:08:36
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z_yui

金虫 (初入文坛)
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引用回帖:
楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-15 12:08:36:
我觉得你可以使用双层平板。第一层使用你菌合适的营养培养基，然后涂布菌种。

第二步，在上面倒上一次磷酸盐培养基。

要注意温度。不要烫死菌体

倒上面那层平板的时候菌还是会被冲散得到处都是，还是不方便测菌落和透明圈的直径啊……
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8楼2011-12-15 12:52:32
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plumplumgxc

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
z_yui(金币+1): 2011-12-15 22:25:32
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-12-15 12:08:36:
我觉得你可以使用双层平板。第一层使用你菌合适的营养培养基，然后涂布菌种。

第二步，在上面倒上一次磷酸盐培养基。

要注意温度。不要烫死菌体

个人意见：下层只是琼脂层，不加营养，上层铺磷酸盐培养基（注意摇匀）薄薄一层即可，再接菌
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科研这条道不好走啊。。。
9楼2011-12-15 16:21:10
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