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石城之子

木虫 (正式写手)

[求助] PCR-DGGE的引物设计

求助环境中分析真菌、细菌、放线菌多样性和种群结构时,采用PCR-DGGE分析时的引物,最好是巢式PCR的引物对。拜谢!
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2b老青年。。。
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1994无敌8

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiadongliang at 2011-12-12 14:29:04
这都是通用引物。(免费赠送,哈哈)
细菌16S rDNA V3 region  194 bp
338F:5-CCT ACG GGA GGC AGC AG-3
518 R:5-ATT ACC GCG GCT GCT GG-3
GC338F:5-CGCCCGGGGCGCGCCCCGGGGCGGGGCGGGGGCGCGGGGGG CCT ACG GG ...

我想问问 条件什么的能P出来更好呢
6楼2017-08-18 15:34:41
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励应助 2011-12-12 15:15:17
石城之子(金币+15): 能否给出相关文献,拜谢! 2011-12-12 23:19:00
这都是通用引物。(免费赠送,哈哈)
细菌16S rDNA V3 region  194 bp
338F:5-CCT ACG GGA GGC AGC AG-3
518 R:5-ATT ACC GCG GCT GCT GG-3
GC338F:5-CGCCCGGGGCGCGCCCCGGGGCGGGGCGGGGGCGCGGGGGG CCT ACG GGA GGC AGC AG-3
8%凝胶35%-55%  200V 电泳3 h

真菌18S rDNA          340 bp
FR1:5-AIC CAT TCA ATC GGT AIT-3
FF390:5-CGA TAA CGA ACG AGA CCT-3
FR1:5-CGCCCGGGGCGCGCCCCGGGGCGGGGCGGGGGCGCGGGGGG AIC CAT TCA ATC GGT AIT-3
200V 电泳4 h
6%凝胶35%-55%  

放线菌                270 bp
F243:5- GGA TGA GCC CGC GGC CTA-3
R513:5- CGG CCG CGG CTG CTG GCA CGT A-3
R513:5-CGCCCGGGGCGCGCCCCGGGGCGGGGCGGGGGCGCGGGGGG CGG CCG CGG CTG CTG GCA CGT A-3
6%凝胶35%-55%  200V 电泳3.5 h
2楼2011-12-12 14:29:04
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琪瑶儿

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857(金币+3): 鼓励新虫 2011-12-12 15:15:24
石城之子(金币+5): 谢谢了啊,能否给我源文献。拜谢啊! 2011-12-12 23:20:04
Outer PCR 引物:CA/CT 简并位点
正向引物8f为(5′-ggA gAg TTT gAT CA/CT ggC T-3′) 20bp
反向引物798r为( 5′-CCA ggg TAT CTA ATC CTg TT -3′) 20bp
Inner PCR 引物:
341F-GC (5′-cgc ccg ccg cgc gcg gcg ggc ggg gcg ggg gca cgg ggg gCC TAC gCg Agg CAg CAg-3′) 57bp
534R (5′-ATT ACC gCg gCT gCT gg-3′) 17bp

我用过这个
海洋环境微生物《DGGE,海洋污染修复
3楼2011-12-12 14:56:40
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mima146

银虫 (小有名气)

真菌18S rDNA          340 bp
FR1:5-AIC CAT TCA ATC GGT AIT-3
FF390:5-CGA TAA CGA ACG AGA CCT-3
FR1:5-CGCCCGGGGCGCGCCCCGGGGCGGGGCGGGGGCGCGGGGGG AIC CAT TCA ATC GGT AIT-3
200V 电泳4 h
6%凝胶35%-55%
5楼2012-07-22 18:57:51
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