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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 样品浓了就会分叉，怎么回事？
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zhongguo_2

金虫 (小有名气)

[求助] 样品浓了就会分叉，怎么回事？

我用的是安捷伦5mm的C18柱，用乙腈和缓冲盐梯度洗脱，样品配的稍微弄了点就会分叉，峰型像个“凹”，两边高且尖，中间相对低而且很平，将样品稀释后重新走一遍就会好了，应该是柱子的问题，因为换成相同的柱子问题后，浓了也只是平头而已。求助，是柱子坏了吗？

稀释前的谱图



稀释后的谱图

换成相同型号的柱子，走稀释前的样品



[ Last edited by zhongguo_2 on 2011-12-9 at 13:22 ]
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1楼 2011-12-09 12:58:11
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

zhongguo_2(金币+1): 2011-12-09 13:42:30
溶剂与流动相不匹配的话，也可能出现这种情况。
另外一根色谱柱做的图也不好，可能还是样品有问题。
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2楼2011-12-09 13:28:58
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zhongguo_2

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ltxin2009 at 2011-12-09 13:28:58:
溶剂与流动相不匹配的话，也可能出现这种情况。
另外一根色谱柱做的图也不好，可能还是样品有问题。

前面一个峰是乙酸乙酯的，样品是用乙酸乙酯做溶剂，峰型还都不错的。
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3楼2011-12-09 13:33:41
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zhongguo_2(金币+2): 是的，但是相同型号的柱子，为什么另外一个能承受相应的浓度呢？因为我这边流速有时候是1有时候是2，我怕因为流速高，压力大，而对柱子造成影响，就像你说的，塌陷！ 2011-12-09 15:19:14
可能是柱子的问题，柱子塌陷或是柱头污染都会导致峰分叉的。
再一个可能是你的进样浓度太大了，超载了，你自己也做了，稀释后进样不就好了。
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4楼2011-12-09 14:21:16
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zhongguo_2

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaolianhai at 2011-12-09 14:21:16:
可能是柱子的问题，柱子塌陷或是柱头污染都会导致峰分叉的。
再一个可能是你的进样浓度太大了，超载了，你自己也做了，稀释后进样不就好了。

是的，但是相同型号的柱子，为什么另外一个能承受相应的浓度呢？因为我这边流速有时候是1有时候是2，我怕因为流速高，压力大，而对柱子造成影响，就像你说的，塌陷！
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5楼2011-12-09 15:19:52
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhongguo_2 at 2011-12-09 15:19:52:
是的，但是相同型号的柱子，为什么另外一个能承受相应的浓度呢？因为我这边流速有时候是1有时候是2，我怕因为流速高，压力大，而对柱子造成影响，就像你说的，塌陷！

同一型号的柱子，但不是同一批次的，也会有差异的，即使是同一批次的柱子，色谱柱也会或多或少的有些差异的，特别是你这种正相的硅胶柱，差异就更大了。还有一个可能，是某些物质吸附上去后就很难冲洗下来，导致的柱子的超载。而能分开的柱子，吸附的物质比较少，所以没分叉。
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6楼2011-12-09 21:57:23
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狒狒童鞋

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhongguo_2(金币+1): 2011-12-12 13:12:31
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaolianhai at 2011-12-09 14:21:16:
可能是柱子的问题，柱子塌陷或是柱头污染都会导致峰分叉的。
再一个可能是你的进样浓度太大了，超载了，你自己也做了，稀释后进样不就好了。

塌陷的话应该是所有的峰都回分叉或者出现肩峰
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我打球你介意吗？
7楼2011-12-11 13:35:08
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408851978

木虫 (著名写手)

道圣

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhongguo_2(金币+1): 谢谢建议 2011-12-12 13:12:48
进样量一定要小点，否则对仪器和柱子都有损害
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奋斗是金！
8楼2011-12-11 13:42:28
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cpuyxj

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhongguo_2(金币+1): 2011-12-15 12:40:18
之前有用那个柱子用过离子对试剂吗？如果有的话会导致峰开叉
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再想哭，也要微笑着说一句：你大爷的。
9楼2011-12-15 10:26:30
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zhongguo_2

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cpuyxj at 2011-12-15 10:26:30:
之前有用那个柱子用过离子对试剂吗？如果有的话会导致峰开叉

没有用过，只走缓冲盐的，0.02M/l的磷酸二氢钠和乙腈梯度洗脱。上面两根柱子，厂家、型号、规格一模一样的，不知道怎么回事！
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10楼2011-12-15 12:39:56
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