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zhongguo_2

金虫 (小有名气)

[求助] 样品浓了就会分叉,怎么回事?

我用的是安捷伦5mm的C18柱,用乙腈和缓冲盐梯度洗脱,样品配的稍微弄了点就会分叉,峰型像个“凹”,两边高且尖,中间相对低而且很平,将样品稀释后重新走一遍就会好了,应该是柱子的问题,因为换成相同的柱子问题后,浓了也只是平头而已。求助,是柱子坏了吗?

稀释前的谱图



稀释后的谱图

换成相同型号的柱子,走稀释前的样品



[ Last edited by zhongguo_2 on 2011-12-9 at 13:22 ]
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zhongguo_2

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ltxin2009 at 2011-12-09 13:28:58:
溶剂与流动相不匹配的话,也可能出现这种情况。
另外一根色谱柱做的图也不好,可能还是样品有问题。

前面一个峰是乙酸乙酯的,样品是用乙酸乙酯做溶剂,峰型还都不错的。
3楼2011-12-09 13:33:41
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

zhongguo_2(金币+1): 2011-12-09 13:42:30
溶剂与流动相不匹配的话,也可能出现这种情况。
另外一根色谱柱做的图也不好,可能还是样品有问题。
2楼2011-12-09 13:28:58
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zhongguo_2(金币+2): 是的,但是相同型号的柱子,为什么另外一个能承受相应的浓度呢?因为我这边流速有时候是1有时候是2,我怕因为流速高,压力大,而对柱子造成影响,就像你说的,塌陷! 2011-12-09 15:19:14
可能是柱子的问题,柱子塌陷或是柱头污染都会导致峰分叉的。
再一个可能是你的进样浓度太大了,超载了,你自己也做了,稀释后进样不就好了。
4楼2011-12-09 14:21:16
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zhongguo_2

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaolianhai at 2011-12-09 14:21:16:
可能是柱子的问题,柱子塌陷或是柱头污染都会导致峰分叉的。
再一个可能是你的进样浓度太大了,超载了,你自己也做了,稀释后进样不就好了。

是的,但是相同型号的柱子,为什么另外一个能承受相应的浓度呢?因为我这边流速有时候是1有时候是2,我怕因为流速高,压力大,而对柱子造成影响,就像你说的,塌陷!
5楼2011-12-09 15:19:52
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