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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DCFH-DA探针—细胞死后探针还存在吗
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yeminqiang

金虫 (小有名气)

[交流] DCFH-DA探针—细胞死后探针还存在吗

最近在做活性氧，用的是DCFH-DA探针，请问ROS与探针结合后生成具有荧光的DCFH，那要是之后细胞死了，那DCFH的荧光还存在吗
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1楼 2011-12-06 10:52:40
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zrn_jane

木虫 (小有名气)
★
yeminqiang(金币+1):谢谢参与
我听师兄说过, ROS是存在于活细胞中的，所以相应死细胞里自然不会有DCFH了
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2楼2012-02-07 15:06:19
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酸奶一号

银虫 (小有名气)
★
yeminqiang(金币+1): 谢谢参与
首先，DCFH-DA和DCFH均为无荧光物质，真正具有荧光的应该为DCF；其次荧光探针检测原理最重要的一条是需要在相关酶（酯酶或过氧化物酶）作用下于ROS反应产生具有荧光的DCF，细胞存在两种可能情况：一是通过加热杀死细胞，相应的酶失活，也就不可能产生DCF，即无荧光；另外一种情况，细胞死亡，但胞内酶仍存活，如果在死亡初期，仍然是有ROS存在，这种情况下显然是具有荧光的，但荧光强度可能与正常细胞不同。第一种情况我已经通过试验证实，第二种情况为推论，还请进一步验证。谢谢
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3楼2014-11-18 15:17:24
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