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DCFH-DA探针—细胞死后探针还存在吗
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yeminqiang
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[交流]
DCFH-DA探针—细胞死后探针还存在吗
最近在做活性氧,用的是DCFH-DA探针,请问ROS与探针结合后生成具有荧光的DCFH,那要是之后细胞死了,那DCFH的荧光还存在吗
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2011-12-06 10:52:40
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zrn_jane
木虫
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★
yeminqiang(金币
+1
):谢谢参与
我听师兄说过, ROS是存在于活细胞中的,所以相应死细胞里自然不会有DCFH了
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2楼
2012-02-07 15:06:19
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银虫
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虫号: 1002977
★
yeminqiang(金币+1): 谢谢参与
首先,DCFH-DA和DCFH均为无荧光物质,真正具有荧光的应该为DCF;其次荧光探针检测原理最重要的一条是需要在相关酶(酯酶或过氧化物酶)作用下于ROS反应产生具有荧光的DCF,细胞存在两种可能情况:一是通过加热杀死细胞,相应的酶失活,也就不可能产生DCF,即无荧光;另外一种情况,细胞死亡,但胞内酶仍存活,如果在死亡初期,仍然是有ROS存在,这种情况下显然是具有荧光的,但荧光强度可能与正常细胞不同。第一种情况我已经通过试验证实,第二种情况为推论,还请进一步验证。谢谢
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3楼
2014-11-18 15:17:24
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