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yeminqiang

金虫 (小有名气)

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[交流] DCFH-DA探针—细胞死后探针还存在吗

最近在做活性氧，用的是DCFH-DA探针，请问ROS与探针结合后生成具有荧光的DCFH，那要是之后细胞死了，那DCFH的荧光还存在吗

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1楼 2011-12-06 10:52:40

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酸奶一号

银虫 (小有名气)

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★
yeminqiang(金币+1): 谢谢参与

首先，DCFH-DA和DCFH均为无荧光物质，真正具有荧光的应该为DCF；其次荧光探针检测原理最重要的一条是需要在相关酶（酯酶或过氧化物酶）作用下于ROS反应产生具有荧光的DCF，细胞存在两种可能情况：一是通过加热杀死细胞，相应的酶失活，也就不可能产生DCF，即无荧光；另外一种情况，细胞死亡，但胞内酶仍存活，如果在死亡初期，仍然是有ROS存在，这种情况下显然是具有荧光的，但荧光强度可能与正常细胞不同。第一种情况我已经通过试验证实，第二种情况为推论，还请进一步验证。谢谢