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hxy2011

金虫 (小有名气)

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[交流] pET-28a载体移码突变问题

我准备克隆并表达一段基因的全长。我选的载体是pET28a表达载体。分别在前向引物和后向引物的5端加HindIII和XhoI这两个酶切位点用于定向克隆。
设计引物时我注意到从ATG到HindIII之间碱基数目不是3的倍数，这样在设计引物时需要考虑移码突变的问题吗？又如何避免引起移码突变的产生？需要在HindIII位点之后补充2个碱基加以避免吗？请高手多多指教啊。谢谢！

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1楼 2011-12-05 17:10:08

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joan198108

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★
hxy2011(金币+1):谢谢参与

这个需要补充至3的倍数吗？如果这样的话，前面质粒本身的起始密码子之后的核苷酸数目也要考虑了吧？

赞一下(2人)

5楼2011-12-06 14:53:26

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joan198108

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7楼2011-12-06 18:17:38

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