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石头影子2002

木虫 (正式写手)

[交流] 96孔板做MTT时该显色的不显色，细胞污染？请求支援

初做MTT，做了3次都失败了。真是郁闷，不知道问题到底出在哪里？我最后用排枪加细胞时，是从下往上加的，最后观察细胞时发现从地5排-第8排的细胞本来应该长势良好，结果却死了。怎么回事呢？是不是手臂跨越无菌区，导致细胞染菌？请高手指点
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1楼2011-11-28 11:37:44
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石头影子2002

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by liyangmiscap at 2011-11-30 10:55:07:
我只做过贴壁细胞的MTT，对于悬浮细胞不是很熟悉啊，你不加药物，正常培养的细胞加入MTT后也不能正常显色吗？你的MTT没有问题吗？

有显色的，MTT应该没问题。显色前显微镜下看细胞，正常组的细胞就有死亡迹象了。谢谢你
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10楼2011-11-30 11:02:48
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航航宝贝

银虫 (正式写手)
★
石头影子2002(金币+1):谢谢参与
送鲜花一朵
个人感觉不应该是这个原因，再找找其他方面原因
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2楼2011-11-28 13:52:50
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
石头影子2002(金币+1):谢谢参与
jhu132llh(金币+2): good,鼓励积极应助 2011-12-01 17:39:49
首先要确认你的实验用品是否完全灭菌消毒？
细胞瓶内的细胞状态是否正常？
消化时是否时间过长，导致细胞状态不佳或是死亡
铺板前细胞悬液是否吹打均匀？
铺板后是否在显微镜下观察细胞状态和密度？
是否是加入了其他药物导致细胞死亡？
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-11-29 13:55:49
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★
石头影子2002(金币+1):谢谢参与
细胞是不是污染是很明显的
应该不是细胞污染的问题
所以。。。。。。
你先做一组
不加药物，其他处理手段一样的的96孔板
看看细胞的生长情况
如果这个组没问题的话
可能是药物处理导致
那就需要重新调整药物的浓度
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4楼2011-11-29 15:11:30
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