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石头影子2002

木虫 (正式写手)


[交流] 96孔板做MTT时该显色的不显色,细胞污染?请求支援

初做MTT,做了3次都失败了。真是郁闷,不知道问题到底出在哪里?我最后用排枪加细胞时,是从下往上加的,最后观察细胞时发现从地5排-第8排的细胞本来应该长势良好,结果却死了。怎么回事呢?是不是手臂跨越无菌区,导致细胞染菌?请高手指点
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)


★ ★ ★
石头影子2002(金币+1):谢谢参与
jhu132llh(金币+2): good,鼓励积极应助 2011-12-01 17:39:49
首先要确认你的实验用品是否完全灭菌消毒?
细胞瓶内的细胞状态是否正常?
消化时是否时间过长,导致细胞状态不佳或是死亡
铺板前细胞悬液是否吹打均匀?
铺板后是否在显微镜下观察细胞状态和密度?
是否是加入了其他药物导致细胞死亡?
3楼2011-11-29 13:55:49
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)


石头影子2002(金币+1): 2012-02-16 10:03:05
引用回帖:
6楼: Originally posted by 石头影子2002 at 2011-11-30 09:34:26:
非常感谢你的回复,细胞是UT7悬浮细胞,依赖EPO。我培养的应该正常生长的全部死了,而且做了3次情况都一样。郁闷啊

我只做过贴壁细胞的MTT,对于悬浮细胞不是很熟悉啊,你不加药物,正常培养的细胞加入MTT后也不能正常显色吗?你的MTT没有问题吗?
9楼2011-11-30 10:55:07
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