24小时热门版块排行榜    

查看: 2312  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

daiguoying

木虫 (小有名气)

[求助] MTT实验用蛋白过滤后浓度降低很多怎么回事

求助各位大虾:
mtt 实验用蛋白加样前用0.2um 滤膜过滤,MTT实验结果出来后发现只有最高浓度有抑制效果,怀疑蛋白浓度有问题,因为过滤前发现溶液中有细小颗粒析出,再次测过滤后蛋白浓度,才发现原来几乎没有蛋白了,这是到底是怎么回事呢,怎样解决?(滤膜之前一直用没问题)
蛋白用PB缓冲液溶解,另外含NaCl 0.5mol/l ,甘油体积比为20%,DTT 5umol/l
蛋白为包涵体表达,最后用超滤管超滤,蛋白过滤前侧浓度为200ug/ml
不剩感激~


[ Last edited by daiguoying on 2011-11-21 at 23:00 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

DO NOT LOSE TIME
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

有何不可

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做的时候过滤了,当时看到有沉淀,应该是还没有溶解的MTT颗粒吧,但我还是把它过滤掉了,做出的结果还不错。你看看其他地方还有疏漏的吗,有没有加0.1%的HCL,,
只要努力,你想要的,岁月都会给你.
5楼2011-11-23 10:01:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

daiguoying

木虫 (小有名气)

不要沉呐,钱还没撒出,真心等待高人指点
DO NOT LOSE TIME
2楼2011-11-22 14:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖木warm

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by daiguoying at 2011-11-21 22:48:36:
求助各位大虾:
mtt 实验用蛋白加样前用0.2um 滤膜过滤,MTT实验结果出来后发现只有最高浓度有抑制效果,怀疑蛋白浓度有问题,因为过滤前发现溶液中有细小颗粒析出,再次测过滤后蛋白浓度,才发现原来几乎 ...

蛋白是大分子,过滤的话应该会浓度降低,我试过,所以,我就不过滤了。你用什么方法测的蛋白浓度?
3楼2011-11-22 19:18:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daiguoying

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 暖木warm at 2011-11-22 19:18:14:
蛋白是大分子,过滤的话应该会浓度降低,我试过,所以,我就不过滤了。你用什么方法测的蛋白浓度?

首先,谢谢你
我用考马斯亮蓝测得蛋白浓度,另外,如果做MTT不过滤的话染菌怎么办呢?
谢谢
DO NOT LOSE TIME
4楼2011-11-22 21:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +4 ziyangfang 2026-08-19 4/200 2026-08-19 10:23 by JChen2024
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +10 基诺咪客 2026-08-17 13/650 2026-08-19 10:22 by cssunt
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +8 启萌科技 2026-08-12 30/1500 2026-08-19 10:22 by 启萌科技
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +6 kkkl_v 2026-08-19 6/300 2026-08-19 10:15 by zhangev
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +52 医学老男孩 2026-08-13 114/5700 2026-08-19 09:38 by 医学老男孩
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 朋友圈看到的 +5 wangzilk 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:05 by luw152
[基金申请] 不应该看fileCode +8 且听虎啸 2026-08-12 10/500 2026-08-19 08:03 by luw152
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
请填处理意见