24小时热门版块排行榜    

查看: 2449  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

daiguoying

木虫 (小有名气)

[求助] MTT实验用蛋白过滤后浓度降低很多怎么回事

求助各位大虾:
mtt 实验用蛋白加样前用0.2um 滤膜过滤,MTT实验结果出来后发现只有最高浓度有抑制效果,怀疑蛋白浓度有问题,因为过滤前发现溶液中有细小颗粒析出,再次测过滤后蛋白浓度,才发现原来几乎没有蛋白了,这是到底是怎么回事呢,怎样解决?(滤膜之前一直用没问题)
蛋白用PB缓冲液溶解,另外含NaCl 0.5mol/l ,甘油体积比为20%,DTT 5umol/l
蛋白为包涵体表达,最后用超滤管超滤,蛋白过滤前侧浓度为200ug/ml
不剩感激~


[ Last edited by daiguoying on 2011-11-21 at 23:00 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

DO NOT LOSE TIME
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daiguoying

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 暖木warm at 2011-11-22 19:18:14:
蛋白是大分子,过滤的话应该会浓度降低,我试过,所以,我就不过滤了。你用什么方法测的蛋白浓度?

首先,谢谢你
我用考马斯亮蓝测得蛋白浓度,另外,如果做MTT不过滤的话染菌怎么办呢?
谢谢
DO NOT LOSE TIME
4楼2011-11-22 21:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

daiguoying

木虫 (小有名气)

不要沉呐,钱还没撒出,真心等待高人指点
DO NOT LOSE TIME
2楼2011-11-22 14:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖木warm

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by daiguoying at 2011-11-21 22:48:36:
求助各位大虾:
mtt 实验用蛋白加样前用0.2um 滤膜过滤,MTT实验结果出来后发现只有最高浓度有抑制效果,怀疑蛋白浓度有问题,因为过滤前发现溶液中有细小颗粒析出,再次测过滤后蛋白浓度,才发现原来几乎 ...

蛋白是大分子,过滤的话应该会浓度降低,我试过,所以,我就不过滤了。你用什么方法测的蛋白浓度?
3楼2011-11-22 19:18:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

有何不可

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做的时候过滤了,当时看到有沉淀,应该是还没有溶解的MTT颗粒吧,但我还是把它过滤掉了,做出的结果还不错。你看看其他地方还有疏漏的吗,有没有加0.1%的HCL,,
只要努力,你想要的,岁月都会给你.
5楼2011-11-23 10:01:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-28 22:21 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见