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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】MTT实验中零对照的值偏高是怎么回事
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fl378

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】MTT实验中零对照的值偏高是怎么回事

各位大侠：有一个问题请教，我做的MTT实验总共四次，每次的零对照都在0.2到0.3几，第四次竟然达到0.7，谁能告诉我这是怎么回事呢？
零对照，我是从铺板开始做的，除了没有细胞和试验药物之外，其他的都是与实验组一致的。非常的困惑，望不吝赐教！多谢！
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1楼2010-11-19 20:32:10
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randomqd

木虫 (小有名气)

是不是这个？

★ ★ ★
scelab(金币+3):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-19 23:03:35
MTT在培养基或是PBS中本身也会有一些颜色变化，要把这个变化也计入在内。。。
做一个不加细胞的看看知道多少时间内有多少个OD变化。。
只能说空白对算的计算还是漏了这个
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2楼2010-11-19 22:21:12
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fl378

银虫 (小有名气)

谢谢您的回复

引用回帖:
Originally posted by randomqd at 2010-11-19 22:21:12:
MTT在培养基或是PBS中本身也会有一些颜色变化，要把这个变化也计入在内。。。
做一个不加细胞的看看知道多少时间内有多少个OD变化。。
只能说空白对算的计算还是漏了这个

有个同学告诉我说，零对照前面的步骤都不做，只有在加MTT那一步才开始跟加药孔一样处理，但是这样的话我感觉其实是忽略了很多因素，比如说培养基中的各成分和D-hanks等的影响。你觉得呢？不知道你是怎么做的？
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3楼2010-11-20 12:44:28
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zengfang122

新虫 (初入文坛)
我也遇到了这样的问题，空白吸光值竟然在0.2-0.3之间。请问楼主解决这个问题了没
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4楼2010-11-28 23:01:46
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monkey77520

金虫 (正式写手)
啊？学习了，零对照原来这么的麻烦
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5楼2011-04-14 12:14:09
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liwenmin

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看了你的情况，我想到了以下几点，不知对你是否有用
1.实验材料：我首先会检查实验方法中所有用到的试剂，若再做重复实验时会将所有试剂重新配置，尤其是对MTT和DMSO的检查。如果MTT是你自己配置的，或者DMSO更换不同厂家，结果都会出现一定差异。
2.实验操作：操作手法也不能忽视，尤其是在MTT反应后加入DMSO时，这个环节也是应注意的，因为试剂本身也具有颜色，从而也会对结果遭成误差。
3.波长选定：参考文献，看一下自己选定的波长是否是合适的波长。
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6楼2012-04-12 14:32:21
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fl378

银虫 (小有名气)
引用回帖:
81095楼: Originally posted by randomqd at 2010-11-19 22:21:12:
MTT在培养基或是PBS中本身也会有一些颜色变化，要把这个变化也计入在内。。。
做一个不加细胞的看看知道多少时间内有多少个OD变化。。
只能说空白对算的计算还是漏了这个

零对照就是不加细胞的
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7楼2012-04-13 00:51:20
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