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fl378

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】MTT实验中零对照的值偏高是怎么回事

各位大侠:有一个问题请教,我做的MTT实验总共四次,每次的零对照都在0.2到0.3几,第四次竟然达到0.7,谁能告诉我这是怎么回事呢?
零对照,我是从铺板开始做的,除了没有细胞和试验药物之外,其他的都是与实验组一致的。非常的困惑,望不吝赐教!多谢!
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randomqd

木虫 (小有名气)


是不是这个?

★ ★ ★
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-19 23:03:35
MTT在培养基或是PBS中本身也会有一些颜色变化,要把这个变化也计入在内。。。
做一个不加细胞的看看知道多少时间内有多少个OD变化。。
只能说空白对算的计算还是漏了这个
2楼2010-11-19 22:21:12
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fl378

银虫 (小有名气)


谢谢您的回复

引用回帖:
Originally posted by randomqd at 2010-11-19 22:21:12:
MTT在培养基或是PBS中本身也会有一些颜色变化,要把这个变化也计入在内。。。
做一个不加细胞的看看知道多少时间内有多少个OD变化。。
只能说空白对算的计算还是漏了这个

有个同学告诉我说,零对照前面的步骤都不做,只有在加MTT那一步才开始跟加药孔一样处理,但是这样的话我感觉其实是忽略了很多因素,比如说培养基中的各成分和D-hanks等的影响。你觉得呢?不知道你是怎么做的?
3楼2010-11-20 12:44:28
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zengfang122

新虫 (初入文坛)


我也遇到了这样的问题,空白吸光值竟然在0.2-0.3之间。请问楼主解决这个问题了没
4楼2010-11-28 23:01:46
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monkey77520

金虫 (正式写手)


啊?学习了,零对照原来这么的麻烦
5楼2011-04-14 12:14:09
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liwenmin

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看了你的情况,我想到了以下几点,不知对你是否有用
1.实验材料:我首先会检查实验方法中所有用到的试剂,若再做重复实验时会将所有试剂重新配置,尤其是对MTT和DMSO的检查。如果MTT是你自己配置的,或者DMSO更换不同厂家,结果都会出现一定差异。
2.实验操作:操作手法也不能忽视,尤其是在MTT反应后加入DMSO时,这个环节也是应注意的,因为试剂本身也具有颜色,从而也会对结果遭成误差。
3.波长选定:参考文献,看一下自己选定的波长是否是合适的波长。
6楼2012-04-12 14:32:21
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fl378

银虫 (小有名气)


引用回帖:
81095楼: Originally posted by randomqd at 2010-11-19 22:21:12:
MTT在培养基或是PBS中本身也会有一些颜色变化,要把这个变化也计入在内。。。
做一个不加细胞的看看知道多少时间内有多少个OD变化。。
只能说空白对算的计算还是漏了这个

零对照就是不加细胞的
7楼2012-04-13 00:51:20
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