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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 虫友们做蛋白结晶用什么方法呢
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puluo-880312

木虫 (正式写手)

[交流] 虫友们做蛋白结晶用什么方法呢

我想用悬滴法。组织培养板是用平时的96孔板之类的呢还是专门在Hampton 之类的公司买呢？另外，买的板是否可以重复使用？那个硅化过的盖玻片能否重复使用？
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1楼2011-12-12 18:13:21
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nach

铜虫 (著名写手)
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lstt09nk(金币+2): 感谢交流 2011-12-13 09:10:20
puluo-880312(金币+2): 非常感谢。希望可以多多交流 2011-12-13 16:55:51
hanging drop
hampton 24 holes
never recycle used plates nor coverslips
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2楼2011-12-12 18:32:56
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月月大可

木虫 (著名写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-12-13 09:10:38
puluo-880312(金币+2): 非常感谢积极参与 2011-12-13 16:55:11
悬滴法适合与优化晶体时候使用，有利于晶体长的更大。
对于初始期的条件筛选建议使用坐滴法，适合大规模条件筛选，简单快速。当初步获得晶体后根据晶体形状和用X光照照情况确定生长条件，可以考虑进一步提高蛋白纯度，对于沉淀剂 ph 蛋白浓度 温度等条件进行梯度筛选，获得最佳晶体。

我们使用的晶体板和玻璃片一般不回收，用完直接扔掉了（其实当废品卖掉了）。
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3楼2011-12-12 19:43:21
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普通回帖

puluo-880312

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by nach at 2011-12-12 18:32:56:
hanging drop
hampton 24 holes
never recycle used plates nor coverslips

那一块板多少钱啊，我在网上看的很贵。这样代价不是很高
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4楼2011-12-13 15:40:24
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
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楼: Originally posted by 月月大可 at 2011-12-12 19:43:21:
悬滴法适合与优化晶体时候使用，有利于晶体长的更大。
对于初始期的条件筛选建议使用坐滴法，适合大规模条件筛选，简单快速。当初步获得晶体后根据晶体形状和用X光照照情况确定生长条件，可以考虑进一步提高蛋白 ...

那你们用的是哪个公司的晶体板和玻璃片啊，价格如何啊
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5楼2011-12-13 15:42:10
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月月大可

木虫 (著名写手)
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puluo-880312(金币+3): 感谢你提供的帮助 2011-12-16 21:32:45
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5楼: Originally posted by puluo-880312 at 2011-12-13 15:42:10:
那你们用的是哪个公司的晶体板和玻璃片啊，价格如何啊

板子好像是hampton，玻璃片最初买的都是普通盖玻片自己硅化。后来闲太麻烦从一个国产的公司买的。
所有东西都是实验室的负责采购与管理的老师订的，我不知道价格。
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6楼2011-12-13 16:20:57
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nach

铜虫 (著名写手)
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puluo-880312(金币+3): 好的，谢谢 2011-12-15 11:54:57
引用回帖:
4楼: Originally posted by puluo-880312 at 2011-12-13 08:40:24:
那一块板多少钱啊，我在网上看的很贵。这样代价不是很高

2.8 dollars per plate plus institut discount, it's not expensive.
Plus, for the experiment, it's worthy to do so
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7楼2011-12-13 16:34:06
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by nach at 2011-12-13 16:34:06:
2.8 dollars per plate plus institut discount, it's not expensive.
Plus, for the experiment, it's worthy to do so

好的，谢谢
麻烦再问你一下，如果我先做一个别人已经结晶出来的蛋白质，那从什么地方下手。是要买试剂盒，还是直接买试剂，自己配，结晶条件可以参考BMCD中的
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8楼2011-12-13 16:51:22
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by 月月大可 at 2011-12-13 16:20:57:
板子好像是hampton，玻璃片最初买的都是普通盖玻片自己硅化。后来闲太麻烦从一个国产的公司买的。
所有东西都是实验室的负责采购与管理的老师订的，我不知道价格。

呵呵。我是我们这边第一个做晶体的，所以什么都要问啊。你们应该做这方面有一段时间了吧
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9楼2011-12-13 16:54:42
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
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puluo-880312(金币+3): 佩服 2011-12-15 11:54:10
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9楼: Originally posted by puluo-880312 at 2011-12-13 16:54:42:
呵呵。我是我们这边第一个做晶体的，所以什么都要问啊。你们应该做这方面有一段时间了吧

我曾经待过的课题组是国内结构生物学的鼻祖级人物，做蛋白质晶体学超过30年。
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10楼2011-12-13 17:10:38
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by 月月大可 at 2011-12-13 17:10:38:
我曾经待过的课题组是国内结构生物学的鼻祖级人物，做蛋白质晶体学超过30年。

哇，厉害，得多多向你请教了
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11楼2011-12-13 17:42:05
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江南的竹

主管区长 (文学泰斗)
puluo-880312(金币+1): 谢谢参与 2011-12-15 11:53:32
^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^
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12楼2011-12-13 17:52:08
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
希望有更多的人参与交流啊
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13楼2011-12-15 11:56:05
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
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楼: Originally posted by nach at 2011-12-12 18:32:56:
hanging drop
hampton 24 holes
never recycle used plates nor coverslips

您好，我想单独买聚乙二醇，请问哪个公司的好一些呢，最好是那个公司有聚乙二醇3350
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14楼2011-12-16 12:29:50
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nach

铜虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+2): 鼓励交流 2012-02-15 17:48:18
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14楼: Originally posted by puluo-880312 at 2011-12-16 05:29:50:
您好，我想单独买聚乙二醇，请问哪个公司的好一些呢，最好是那个公司有聚乙二醇3350

i think from hampton is not bad, their products are pure enough for crystallo but expensive of course.
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15楼2011-12-16 15:50:43
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by nach at 2011-12-16 15:50:43:
i think from hampton is not bad, their products are pure enough for crystallo but expensive of course.

是啊，确实挺贵的。谢谢提供建议，我会认真考虑的
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16楼2011-12-16 18:24:06
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chloe.k

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
puluo-880312(金币+1): 是啊，北京希凯，代售的Hampton的 2011-12-28 22:59:08
板子国内就有卖，24孔，好像是20左右。
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17楼2011-12-28 15:59:43
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puluo1988

铜虫 (小有名气)
学习一下
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18楼2012-02-15 17:30:05
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zhuoer1988

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问悬滴法的英文是drop plate吗？
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19楼2012-07-29 15:07:27
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puluo-880312

木虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by zhuoer1988 at 2012-07-29 15:07:27
请问悬滴法的英文是drop plate吗？

hanging drop
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20楼2012-07-29 17:58:22
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zhuoer1988

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问great plate count anomaly是什么？它与食品的微生物检测有什么关系？谢谢！！！
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21楼2012-07-30 11:31:12
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