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rancase04木虫 (正式写手)
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上下游引物退火温度相差16℃,
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采用文献上的引物 上下游引物退火温度分别为45.2℃和61.4℃,目的片段为1 k bp pcr程序设定: 1:94℃ 5分钟→[94℃ 30秒;60℃ 30秒;72℃ 45秒]→5cycles→[94℃ 30秒;55℃ 30秒;72℃ 45秒]→35cycles→72℃ 5分钟 2:梯度pcr 94℃ 5分钟→[94℃ 30秒;40-60℃ 30秒;72℃ 45秒]→30cycles→72℃ 5分钟 两个程序均为看到目的条带,两个引物温度相差16℃,是不是不能p出来啊 |
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