24小时热门版块排行榜    

查看: 1673  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhaolijunzly

金虫 (小有名气)

[求助] TA克隆不长菌

我的TA克隆不长菌,阳性对照很好,说明感受态没有问题,氨苄的板子是刚配的,连接比例1:9左右,哪出问题了呢?望同仁们指教一二,不胜感激!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaolijunzly

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Marado at 2012-06-11 11:05:11
我目前也遇到了这个问题,
加A后PCR产物:2ul
pMD 19:0.5ul
Buffer(solution I)3.5ul
过夜连接:12-16h
之后用JM109感受态细胞进行转化
涂LE平板(1ml的100mg/ml 氨苄加入到1L的LB培养基)
昨天下午2点半 ...

你的PCR产物得胶回收后定量,才能连接。现在我的做出来了
8楼2012-06-11 16:04:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-11-21 11:07:31
加入感受态的质粒量在5ul内?
目的基因扩增是用高保真酶的话加A了?
目的基因和质粒是否保持良好?
修炼ing,当虫仙……
2楼2011-11-21 10:17:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

转化效率低;
连接有问题。
勤奋、执着、专注,则无坚不破。
3楼2011-11-21 10:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenqian0216

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhaolijunzly: 金币+5, 有帮助 2012-05-26 10:40:28
应该是连接有问题,延长连接时间。
或是回收电泳时有核酸酶末端TA被水解了,建议回收电泳前处理电泳槽
4楼2012-05-19 09:50:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
请填处理意见