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涛声依旧本人

银虫 (初入文坛)

[交流] western抗体问题 已有5人参与

怎么确定抗体的质量问题啊,我买的santa的抗体,可别个说有人说抗体有问题的,跟我说如果有问题就找他哦,呵呵、、、、
可是如果做不出实验就有好多问题呢,怎么去看抗体的问题呢?
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0620602

铜虫 (初入文坛)

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wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-11-21 08:54:34
引用回帖:
1楼: Originally posted by 涛声依旧本人 at 2011-11-19 11:15:57:
怎么确定抗体的质量问题啊,我买的santa的抗体,可别个说有人说抗体有问题的,跟我说如果有问题就找他哦,呵呵、、、、
可是如果做不出实验就有好多问题呢,怎么去看抗体的问题呢?

一般抗体有问题会产生背景较脏,而不会检测不出条带
2楼2011-11-19 11:54:48
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star013

新虫 (知名作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking:编辑内容 2011-11-19 19:03
delete

[ Last edited by amisking on 2011-11-19 at 19:03 ]
3楼2011-11-19 12:55:18
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zengmud2

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-11-21 08:54:11
楼主须做对照试验,才能确定是否为抗体的问题。Santa的抗体大部分还是不错的,不好的批次可以去换。祝楼主顺利。
4楼2011-11-20 19:43:41
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llglo

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜:编辑内容 2011-11-23 20:23
西瓜: 请勿再发广告,先提醒一次! 2011-11-23 20:24:06
-------------广告内容----------

[ Last edited by 西瓜 on 2011-11-23 at 20:23 ]
5楼2011-11-20 23:10:51
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noah1020

新虫 (小有名气)

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西瓜(金币+4): Good! 2011-11-23 20:24:34
santa的抗体有时效价会有问题,我遇到过...我现在用的是cell signaling technology的,抗体效价比santa高~ 不知你有没有发现,santa的抗体都是4度保存的,而且绝对不能冻!如果冻了之后那就瞎了...
我不知道你最后的片子是什么结果,二抗是什么,所以不能确定一定是一抗出了问题~ 如果是常用抗体,比如caspase家族的,一般情况下都会出单一条带,条带比较杂而且背景太脏的就是抗体效价不够高~ 不过也不排除是二抗出的问题~ 我曾经好久没有做出条带,最后发现居然是显色剂的毛病...
不知楼主遇到的是什么情况,说到底,咱们的目的都是要做出漂亮的目的蛋白就行~
6楼2011-11-23 15:41:38
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涛声依旧本人

银虫 (初入文坛)

恩,是的,谢谢
我是新手哦,所以不怎么懂呢,第一次买抗体,有点小贵呢,呵呵、、、
7楼2011-11-24 16:59:09
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涛声依旧本人

银虫 (初入文坛)

我用的二抗是FITC标记的,可以不用显色剂,直接扫膜就好了的,呵呵、、
不过郁闷的是我洗好膜后发现这边的扫膜仪出问题了,用不了哦,就把膜泡在PBS里面保存在的,这样可以吗?
8楼2011-11-24 17:02:43
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