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lmzxcom1

金虫 (著名写手)

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专业: 生物化学

[求助] 蛋白质的糖基化测定

手头有一个酶在毕赤酵母GS115/pPIC9K中表达，表达后的酶根据分析，含有很多天冬酰胺等容易糖基化的位点，现在想测定是否真正糖基化了，如果是，能不能测定糖基化位点呢

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1楼 2011-11-17 17:03:25

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21jianyu1314

金虫 (小有名气)

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虫号: 2884919
注册: 2013-12-20
性别: MM
专业: 食品加工技术

可以测定，一下只是我的想法希望可以对您有帮助，把表达的糖蛋白纯化后用相应的蛋白酶酶切，如Glu-c、Trypsin、Lys-C等，找一个适合的，然后将酶解的产物加热100度，冷却室温后加PNGase F酶，过夜孵育或孵育24小时，将切糖链的与没切的样品分别用HPLC分离找到差异组分做MALDI。具体的可以找文献参考。