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lmzxcom1

金虫 (著名写手)

[求助] 蛋白质的糖基化测定

手头有一个酶在毕赤酵母GS115/pPIC9K中表达,表达后的酶根据分析,含有很多天冬酰胺等容易糖基化的位点,现在想测定是否真正糖基化了,如果是,能不能测定糖基化位点呢
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乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)

最近刚表达了个酶,跑SDS PAGE也发现问题了,条带很大,硫酸铵沉淀不下来,感觉是因为毕赤酵母的糖基化原因,不知楼主怎么处理的?
一花一世界、一叶一菩提
7楼2013-04-17 21:53:24
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查看全部 10 个回答

啊Q精神

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

糖苷酶消化后跑电泳,或者HPLC
糖基化肯定是有的,糖基化程度不好说。比真核细胞的厉害点,比酿酒酵母的轻很多。
2楼2011-11-17 17:25:43
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

能 用质谱能找到糖基化位点的~ 最近听的基因组学方面的讲座比较作 都提到质谱了
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2011-11-17 20:32:37
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lmzxcom1

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fungixx at 2011-11-17 20:32:37:
能 用质谱能找到糖基化位点的~ 最近听的基因组学方面的讲座比较作 都提到质谱了

MS是不要要求样品的纯度很高啊
4楼2011-11-18 08:28:16
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