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xinyaolu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
龙开聪(金币+2): 谢谢好心人,只剩两个金币了,全部给您了,我会尝试去掉信号肽和有信号肽的表达的,谢谢 2011-11-17 22:12:33
silicare(金币+5, BioEPI+1): 有价值 2011-11-18 10:54:55
楼上对信号肽的描述,略有异议,信号肽中存在一段疏水性较强的区域,但并不表示带信号肽就不适合在原核系统中表达,信号肽的存在可能会将蛋白定位于细胞质之外,这样蛋白有活性的概率就会更高。虽然信号肽本身的密码子及二级结构可能会影响外源蛋白的表达,但楼上似乎将包涵体产生的概率估高了。包涵体的产生和很多因素有关:基因来源,宿主等等。。。。        楼主可以先尝试带天然信号肽表达,也可以去掉天然信号肽后在pelB信号肽引导下表达。终止子是的终止转录的,不用加上,很多载体上带有终止子。要想方便纯化可以带标签,载体上的或者自己合成在引物上,这方面的手段可以自己选择。
3楼2011-11-17 18:57:01
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