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汕头大学海洋科学接受调剂
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blastfeng

金虫 (小有名气)

[交流] 关于western上样 已有13人参与

做WB时,为了上样量达到一致,我们老板让我数细胞,按照细胞的数量确定蛋白,我用的是血球板计数,发现一点都不准确,有没有更好点的方法呢,现在国际上通用的方法又是什么呢?有哪位师兄师姐给点好的建议了,谢谢了
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生活就像PCR
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涛声依旧本人

银虫 (初入文坛)


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你可以考虑买试剂盒测总蛋白含量,我们这边有用这个测的,你可以查查
蛋白定量:BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)
9楼2011-11-19 11:10:33
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查看全部 18 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
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wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-11-17 00:21:51
测定蛋白浓度不行吗?
jiayoubashaonian
2楼2011-11-16 18:54:38
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2011加油

银虫 (正式写手)

★ ★
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wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-11-17 00:22:04
首先测定蛋白浓度后,根据你的上样量,取质量相同的各组蛋白样品,体积不同时,用TBST溶液把体积也补齐,再加5乘的loading buffer就行了。
每天都是新开始,2011,要好好努力!
3楼2011-11-16 19:23:45
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dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

★ ★
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西瓜(金币+1): good 2011-11-17 18:50:07
一般是提蛋白质后测浓度,数细胞的话不能保证每个步骤都得到一样的产率
4楼2011-11-17 07:59:20
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