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瞎眼猪猪

新虫 (初入文坛)

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[求助] 重组蛋白前面会不会有其他的氨基酸残基

用pic9k重组了一个蛋白，转到毕赤酵母里，诱导表达后只有一条带，想去鉴定一下是不是自己要的蛋白，做N端测序的话，不知道会不会在我目标序列的前面留有几个别的氨基酸序列（我是只载体上的序列会不会有个别的翻译成氨基酸？

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我自诩一只猪

1楼2011-11-14 00:44:14

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瞎眼猪猪

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 啊Q精神 at 2011-11-15 16:09:01:
你用什么没切位点啊？
按Protocol做的话肯定有残留，一般对蛋白活性没影响。
可以在目的基因蛋白加Glu-Lys-Arg-N（N不能是Pro）KEX2酶切位点这样就会产生天然N端。

谢谢啊~~已经做到表达这块了，就不返回去了。。。N端酶切位点是那个平末端，对比了一下，大概有6个多余的氨基酸。。。悬赏分已经给出去了。。。级别低给不你了。。。