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瞎眼猪猪

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组蛋白前面会不会有其他的氨基酸残基

用pic9k重组了一个蛋白,转到毕赤酵母里,诱导表达后只有一条带,想去鉴定一下是不是自己要的蛋白,做N端测序的话,不知道会不会在我目标序列的前面留有几个别的氨基酸序列(我是只载体上的序列会不会有个别的翻译成氨基酸?
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我自诩一只猪
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没做过酵母的重组蛋白。在E colli里重组蛋白的话,启动子区域内第一个起始密码子之后的序列会被翻译成蛋白,你找下你用的vector的序列信息自己对一下就好了
摒气动方息,宁神心自明。
4楼2011-11-15 08:12:32
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凡夫俗子

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

This could not be happened in your experiment.
2楼2011-11-14 11:02:21
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瞎眼猪猪

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凡夫俗子 at 2011-11-14 11:02:21:
This could not be happened in your experiment.

弱弱的问一句:为啥?启动子后面的一段不会翻译么?
我自诩一只猪
3楼2011-11-14 21:20:56
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cpubiopharm

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

瞎眼猪猪(金币+5): 那从哪可以得到pic9k的全序列呢? 2011-11-15 11:26:10
瞎眼猪猪(金币+5): 那从哪可以得到pic9k的全序列呢? 2011-11-15 11:26:12
这个看你怎么设计的啦,如果用了载体的ATG,后面又没有相应的切割,很可能在N端会有多余序列。

有的蛋白多一两个氨基酸无所谓,有的对N端序列要求严格,多一个都没活性,这个是个问题。
我不知道
5楼2011-11-15 09:06:32
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