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小橘子~

新虫 (初入文坛)

[求助] 求高手解救荧光定量的问题

最近最荧光定量试验,一直很不顺,用的是bioer的试剂,IQ5的机器。做的是miRNA的相对定量表达,用的是∆∆CT法,所扩增的片段有点大,但在200bp之内,出现很奇怪的现象,附上图:
扩增曲线:



溶解曲线:





很是疑惑为什么前面的曲线不平,应该不是机器的问题,因为其他人做没有出现这样的现象,我把浓度给变大10倍也没有很好的改观,求高手指教,非常感谢!

扩增曲线



溶解曲线



溶解曲线的倒数图
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六妖妖

金虫 (正式写手)

扩增效率很低。要么优化反应条件,要么换引物。
7楼2012-05-25 22:17:24
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