应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 小白请问，cDNA第一条链合成后如何做PCR了？
61/1返回列表
查看: 2247  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

[求助] 小白请问，cDNA第一条链合成后如何做PCR了？

cDNA第一条链合成结束后，要做PCR扩目的基因片段，该如何做呢？和正常的DNA做PCR一样吗？哪位有详细点的步骤呀！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-01 16:47:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
和正常PCR一样就可以了。不过cDNA里面不包括内含子，设计引物的时候留意下，别把引物弄到内含子上了。
赞一下 回复此楼
2楼2011-11-01 17:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-01 17:55:08:
和正常PCR一样就可以了。不过cDNA里面不包括内含子，设计引物的时候留意下，别把引物弄到内含子上了。

那请问下我PCR买的是Takara的，里面PCR的步骤与以前DNA的PCR步骤不是太一样呀？麻烦版主帮帮忙！
赞一下 回复此楼
3楼2011-11-02 22:01:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 辛苦! 2011-11-03 10:53:54
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuzhu598 at 2011-11-02 22:01:34:
那请问下我PCR买的是Takara的，里面PCR的步骤与以前DNA的PCR步骤不是太一样呀？麻烦版主帮帮忙！

不知道你自己的PCR条件如何，但是你给的这个程序是很常规的程序啊，你觉得哪里可能不妥当？除了30个循环的步骤，可以在前面加个94℃/5 min预变性，最后加个72℃/5 min来延伸。其他没什么特别的了。
72℃延伸时间根据产物长度调整就可以了，一般Taq酶是1 min/kb。具体参照你的酶的说明书吧。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-11-02 22:19:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-02 22:19:08:
不知道你自己的PCR条件如何，但是你给的这个程序是很常规的程序啊，你觉得哪里可能不妥当？除了30个循环的步骤，可以在前面加个94℃/5 min预变性，最后加个72℃/5 min来延伸。其他没什么特别的了。
72℃延伸时间 ...

嗯，你说的我明白啦，谢谢啦，呵呵，好人开开心心呀1
赞一下 回复此楼
5楼2011-11-03 12:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晓风残月cl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用目的基因引物  反转录产物cDNA作为模板扩增  就是很普通的
我因为要做表达  最近也在做这些的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2011-11-06 18:15:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuzhu598 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 求调剂 +5 十三加油 2026-03-21 5/250 2026-03-21 18:48 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 15/750 2026-03-21 10:16 by 脱颖而出
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666！
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 323求调剂 +3 洼小桶 2026-03-18 3/150 2026-03-20 22:54 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +8 niko- 2026-03-19 9/450 2026-03-20 21:57 by luoyongfeng
[考研] 319求调剂 +3 小力气珂珂 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:47 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭