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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RT-PCR做成这样 求分析
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bffgbgff

新虫 (小有名气)

[求助] RT-PCR做成这样 求分析

请高手帮忙分析下RT-PCR结果，前三条目的基因，最后是GAPDH ,目的基因很奇怪啊，上面目的条带出来了，最下面貌似引物二聚体的条带很亮，，，，这个引物之前用过，没出过这个问题。。。。。不解中，，，有遇到过这种情况的吗？


[ Last edited by 1949stone on 2011-10-31 at 21:51 ]
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1楼 2011-10-31 20:40:23
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yyp1314

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该是引物的问题，底下的也是引物2聚体，你看，下面的亮的条带上面目的条带就暗，说明合成了引物2聚体了，引物不是很特异
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3楼2011-11-19 22:14:16
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jakelly

金虫 (著名写手)

小小科学家

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-11-01 09:12:45
我觉得最下面那个可能不是引物二聚体吧？我从来都没有看过这么亮的二聚体，会不会是其它非特异性扩增，最有可能应该是引物的问题吧！
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爱人的人爱的我
2楼2011-10-31 23:34:05
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

应该是引物的问题！
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jiayoubashaonian
4楼2011-11-19 22:52:48
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凡子1985

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

bffgbgff(金币+5): 2011-11-24 16:46:59
1，很可能是引物二聚体，因为你条带亮的，证耗费的引物多，所以引物二聚体暗，反之亦然。
2，提出一个问题，你做的RTPCR 的循环数太高 条带和内参都太亮  达不到半定量的作用，因为都到平台期了
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5楼2011-11-20 05:45:37
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