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静海

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[求助] 做限制性酶切，请帮忙分析下

第一次做限制性酶切，请大家帮忙分析下(*^__^*) 嘻嘻……
marker是5000。载体是3号是我的条带。我想教一下，
1.我的有4条带，从离加样孔最近的是不是依次为：载体、空载体、目的基因、杂质？
2.理想的情况是3条带么？跑的最慢的那条是未切的载体，亮度较小。其次是空载体和目的基因条带，亮度较大且二者相近。
3.从亮度来看，1、3条带和2、4、5有较大区别，是因为？
4.怎么改进呢？最大的问题是？
O(∩_∩)O谢谢~~~

限制酶切电泳图

[ Last edited by 1949stone on 2011-10-31 at 21:51 ]

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1楼 2011-10-31 18:46:13

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静海

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引用回帖:

7楼: Originally posted by dream-fish at 2011-11-03 13:06:55:
你做的是双酶切，那么我就理解为你是打算做了酶切之后连接到其他载体上面去。但是你的空载体是什么呢？如果也是pmd18-T那么，我认为你的酶切是完全失败的。T载体是不会切出三条带的。一般做双酶切，就是两条带。

好受打击啊，做这个是想做个验证~~我现在刚开始接触，还是不太明白~~