24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1754  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

静海

新虫 (小有名气)

[求助] 做限制性酶切,请帮忙分析下

第一次做限制性酶切,请大家帮忙分析下(*^__^*) 嘻嘻……
marker是5000。载体是3号是我的条带。我想教一下,
1.我的有4条带,从离加样孔最近的是不是依次为:载体、空载体、目的基因、杂质?
2.理想的情况是3条带么?跑的最慢的那条是未切的载体,亮度较小。其次是空载体和目的基因条带,亮度较大且二者相近。
3.从亮度来看,1、3条带和2、4、5有较大区别,是因为?
4.怎么改进呢?最大的问题是?
O(∩_∩)O谢谢~~~

限制酶切电泳图

[ Last edited by 1949stone on 2011-10-31 at 21:51 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 分子生物化学 at 2011-11-01 15:58:05:
限制性内切酶在最佳环境在可以只切单一酶切位点,但是如果环境不适宜,它也有可能去切其他限制性内切酶的酶切位点,我估计你酶切条件不对,请参照酶的说明书改一下酶切条件。

你指的是酶的星活性是么?如果出去这个原因,还有可能是别的不?
5楼2011-11-02 21:12:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)

我觉得你应该把每个泳道对应点的样品是什么,要说清楚。
不然不好分析。
2楼2011-11-01 12:59:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子生物化学

金虫 (小有名气)

实验菜鸟

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-11-01 17:56:40
限制性内切酶在最佳环境在可以只切单一酶切位点,但是如果环境不适宜,它也有可能去切其他限制性内切酶的酶切位点,我估计你酶切条件不对,请参照酶的说明书改一下酶切条件。
做实验有失败才能学到东西
3楼2011-11-01 15:58:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jingdejun at 2011-11-01 12:59:08:
我觉得你应该把每个泳道对应点的样品是什么,要说清楚。
不然不好分析。

做的是公共实验,只有3号的加样孔是我的样。质粒是pMD19-T。用的两种限制性酶:HindIII、EcoRI.
4楼2011-11-02 19:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 320求调剂 +4 深郊akm 2026-04-17 4/200 2026-04-17 17:32 by 一切OK
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 294求调剂 +14 淡然654321 2026-04-15 14/700 2026-04-16 21:01 by lpl364211
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 271求调剂 +35 2261744733 2026-04-11 41/2050 2026-04-14 15:36 by zs92450
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 297工科,求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
信息提示
请填处理意见