应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 原核表达蛋白诱导不出来
21/1返回列表
查看: 3368  |  回复: 16
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yalan_p

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达蛋白诱导不出来

最近用pGEX-4T-1构建了一个融合蛋白的表达载体，测序结果显示没有出现碱基的位移和变异，但是做诱导的时候却一直没有目的蛋白，我的蛋白在23kD左右，GST标签为26kD，诱导后在50kD左右应有比较亮的条带，但是SDS电泳显示30摄氏度诱导4h后的蛋白表达与对照是一样的。上清和沉淀都分别做了电泳，都是一样的结果。
    请教高手，这种情况我该怎么办？可能是什么原因？该如何进一步优化条件？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-26 18:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

yalan_p(金币+1): 唉，基本原理我也明白，现在已经做过了IPTG0.1mmol到1mmol，时间从3到5小时，就是诱导温度还没有改，之前一直是30度诱导 2011-10-26 21:55:17
不同的诱导时间点，
不同的诱导剂量，
不同的诱导温度
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-26 20:19:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yalan_p 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭