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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小崔9333

木虫 (正式写手)


[交流] 纤维素酶国标测定方法中的疑问,求指教

在国标饲用《纤维素酶活性的测定 滤纸法》中,先加酶液和先加DNS有什么区别?在A0的测定中,先加DNS,接着加酶液,会导致酶不起作用吗?还有为什么采用(A1-A0)确定糖含量,而不直接以A0作为空白直接测定A1?有区别吗?谢谢指教:
8.3.2 在25 mL具塞比色管中加入滤纸条(5.8)--滤纸条须对衬剪成32片并全部放入,加1.0 mL柠檬酸盐缓冲液(5.7)浸润滤纸片,37℃水浴平衡10 min,再依次加入2.00 mL DNS试剂(5.9),0.50 mL酶液(8.3.1),5 mL水,电磁振荡3 s-5 s,37℃水浴中保温60 min(用秒表控制),然后再沸水浴中煮沸5 min,冷却至室温,用水定容至25 mL,在540 nm波长处测定校准值A0。
8.3.3 在25 mL具塞比色管中加入滤纸条(5.8)--滤纸条须对衬剪成32片并全部放入,加1.0 mL柠檬酸盐缓冲液(5.7)浸润滤纸片,37℃水浴平衡10 min,再依次加入0.50 mL酶液(8.3.1),5 mL水,电磁振荡3 s-5 s,37℃水浴中保温60 min(用秒表控制),加2.00 mL DNS试剂(5.9),然后再沸水浴中煮沸5 min,冷却至室温,用水定容至25 mL,在540 nm波长处测定吸光度A1。
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yangxulssw106

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-07-17 10:45:17
DNS中有大量氢氧化钠,会导致酶失活。空白对照先加DNS,后加酶是对的。
2楼2012-07-16 16:12:06
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