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得到完整cDNA后,怎么找完整的DNA和确定ORF
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最近用RACE拿到几个基因完整的cDNA序列。然后我想拿到完整的DNA序列同时再次验证一下cDNA测序的结果,就设计了几对引物,提了基因组学列去P,P不出来。。。拿RNA做一步法RT,也P不出来~~~ 一步法RT,没有拿试剂盒,是用的TAKARA的反转录酶,先50度,30min,再94度,2min,然后正常PCR 31个循环。。。。。 额。。。我想问的就是在拿到cDNA序列后,我想拿到带外显子的DNA序列应该以神马方法和步骤进行呢?PS,最终其实是想表达蛋白的,所以还有寻找阅读框的问题,啊啊啊,这个我也是很朦胧,网络上预测的ORF的软件,不知道是否可信。 ![]() |
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6楼2012-04-24 16:55:53
yuxia82012
木虫 (著名写手)
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2楼2011-09-27 14:47:18
3楼2011-09-27 15:31:22
hc1027
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4楼2011-10-17 09:22:31














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