| 查看: 2463 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
SDS-PAGE出现奇怪的拖尾
|
||
|
本科时候跑了一年的E.coli，从来没出现这种情况： 用Pre-cast的胶，前两次跑过没问题，条带清晰蛋白分离很好；电泳缓冲液也是公司的，自己稀释，也是没问题的。电压一直是200V。跑的是全菌，不诱导表达的那种 现象：同一片胶Marker和另一种菌没有拖尾，但是E.coli拖尾严重，跑的时候就看到了，染色后一片模糊。E.coli的样品是新制的，小试管2ml培养7小时，样品处理方式不变，收菌后dI WATER洗两次，加loading buffer煮5分钟，上样量不大（按之前的经验值，上两次跑出的条带清晰分明）。 跑完以后想会不会是杂菌污染之类的问题，或者摇菌时间过长（36C，200rpm），重新挑单菌落接种，4小时培养。煮菌后不到5分钟就上样了依然拖尾，Marker和另一种菌则没有拖尾！！第二次跑胶时候看到上样孔那有残留物，但我确定用移液枪吸取样品时候没有粘稠状的东西~ 求助各位，是不是DNA降解呢？但是之前相同条件，跑E.coli全菌，一直没有这种情况发生，即使是反复冻融的样品或者过夜培养，都没出现类似问题。请问出现了什么问题我忽略了的，应该怎么解决呢？ [ Last edited by 1949stone on 2011-9-29 at 11:39 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有99人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳问题的讨论
已经有17人回复
- 帮我看一下这奇怪的电泳图
已经有6人回复
- 关于SDS-PAGE电泳问题
已经有12人回复
- 【转】我在SDS-PAGE中所犯的错误，欢迎补充！
已经有33人回复
- 细菌总蛋白SDS-PAGE时菌体处理出现粘稠物？？
已经有6人回复
- SDS-PAGE 胶的孔径有多大啊？ 有木有人了解？木有查到。。。
已经有8人回复
- 液相测试 出现拖尾峰怎么办才好？
已经有4人回复
- 【求助】点板出现拖尾，为什么加三乙胺或乙酸可以消除拖尾
已经有11人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平
已经有47人回复
- 【求助】气相色谱图出现拖尾的原因？
已经有13人回复
- 【求助/交流】进行pcr克隆时，出现拖尾现象
已经有6人回复
- 【交流】关于HPLC分析中出现双峰和拖尾峰的一些看法
已经有23人回复
3楼2011-09-27 11:57:49
分子菜鸟
木虫 (小有名气)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 2261.9
- 红花: 3
- 帖子: 136
- 在线: 345.6小时
- 虫号: 1334847
- 注册: 2011-06-30
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2011-09-27 10:43:21
4楼2011-09-27 19:59:24
eileen8519
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1420.4
- 散金: 18
- 红花: 1
- 帖子: 243
- 在线: 75.6小时
- 虫号: 802150
- 注册: 2009-07-02
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
5楼2011-09-27 23:29:49
