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疯花血月

金虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多,请教原因 已有6人参与

我目的蛋白75Kd。蛋白表达后是包涵体,透析3 天后,然后我用超滤管离心,得到的蛋白跑胶,右边第四个条带。为什么包涵体透析后杂蛋白这么多呢?是因为蛋白是我浓缩后的原因吗?或者其他的原因


[ Last edited by 疯花血月 on 2011-9-15 at 20:47 ]
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imfly77

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+5): Good! 2011-09-21 17:27:15
(1)从小条带的亮度来看,你做的包涵体蛋白很可能有大小亚基。或者也有可能有另一种蛋白共同过量表达。
(2)要除掉小蛋白,可以在目的蛋白上加上Histag,表达后将沉淀用8M尿素溶解,在变性条件(8M尿素)过Ni柱纯化。
7楼2011-09-21 15:30:33
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