24小时热门版块排行榜    

查看: 8834  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

380218013

金虫 (小有名气)

[求助] 如何加polyA尾巴。

小弟用高保真酶PCR,胶回收之后想与T载体相连,需要在产物后加polyA的尾巴。在网上看到说纯化后加Taq酶72度10min 。但是是否还要加buffe等其他的试剂?如果加,加的体系是多少?反应条件是什么?小弟想知道具体的步骤。


请有过实战经验的大虾们帮忙!谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

好好生活,努力赚钱
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 是这样的 2011-09-14 22:14:22
不用了,就在pfu程序完了后,加点儿taq酶就可以了,不需要再加什么dATP的!
致良知
4楼2011-09-14 21:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-14 07:32:29
380218013(金币+1): 好像只要72度 30min 吧 要加buffer 什么的 2011-09-14 16:44:06
跟你平时做PCR的体系一样,只不过将dNTP换成dATP !
真相是最大的奢侈品
2楼2011-09-13 22:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-14 18:14:20
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-13 22:00:19:
跟你平时做PCR的体系一样,只不过将dNTP换成dATP !

跟你平时做PCR的体系一样,只不过将dNTP换成dATP !
扩增程序就按你说的就可以了!
真相是最大的奢侈品
3楼2011-09-14 17:50:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alice

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-09-14 21:44:43:
不用了,就在pfu程序完了后,加点儿taq酶就可以了,不需要再加什么dATP的!

可以吗?我之前按胶回收后加dATP,72度加A好像不行呢...
To be strong enough
5楼2011-09-16 10:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 329求调剂 +5 想上学吖吖 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:56 by 23Postgrad
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +5 Doleres 2026-03-19 5/250 2026-03-19 20:14 by 制度的
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +5 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 6/300 2026-03-18 17:53 by 无际的草原
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +7 步川酷紫123 2026-03-13 7/350 2026-03-18 17:12 by 尽舜尧1
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 302求调剂 +10 呼呼呼。。。。 2026-03-17 10/500 2026-03-18 12:45 by Linda Hu
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
请填处理意见