应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于大肠表达纯化过程中的两个小问题
121/1返回列表
查看: 1406  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

[交流] 关于大肠表达纯化过程中的两个小问题

首先是诱导的时候（我们是16度），老师总让温度稳稳的降到了16度再加IPTG，培养基热一点都不行，这是为什么啊，我感觉只要后边诱导表达过程温度控制好就行啊= =
还有就是蛋白胶脱色液里的乙酸和乙醇分别起什么作用啊，简单介绍下就行
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-09-07 14:25:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuihaizi

金虫 (小有名气)
★ ★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-09-08 22:12:09
诱导的温度没有那么严格的，37度培养完，直接加IPTG再放到16度摇就行。至于第二个问题我不清楚。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-09-07 16:27:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+4, MolEPI+1): Good 2011-09-08 22:12:19
加乙醇或者甲醇是为了更容易洗脱考马斯亮蓝，加得越多洗脱越容易，结合在蛋白上的染料也容易洗下来。而冰乙酸是固定蛋白的，防止蛋白扩散。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-09-07 21:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojianping

木虫 (正式写手)
★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
估计导师是怕你摇过头，IPTG的诱导效果不好。其实没那么严格啦。稍微凉到室温差不多也就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-08 14:50:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪戎

新虫 (初入文坛)
★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
为什么真核基因结构中会出现内含子啊？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-09-08 20:34:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 雪戎 at 2011-09-08 20:34:50:
为什么真核基因结构中会出现内含子啊？

哦。。。哦感觉内含子的存在可以让基因的可变性或者说储存的遗传信息量更大
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

西瓜
7楼2011-09-08 20:54:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
送鲜花一朵
dhd997(金币+1): 来点详细的？ 2011-09-09 07:57:10
引用回帖:
7楼: Originally posted by loveskyzhou at 2011-09-08 20:54:25:
哦。。。哦感觉内含子的存在可以让基因的可变性或者说储存的遗传信息量更大

有见地哦。不过要是把内含子换成等量的编码序列，会不会信息量更多呢?嘿嘿~
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-09-08 22:13:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

btx362237729

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
为什么我们做诱导从来没降低温度到16呢。。。。。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-09-09 12:40:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imfly77

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-09-07 21:25:12:
加乙醇或者甲醇是为了更容易洗脱考马斯亮蓝，加得越多洗脱越容易，结合在蛋白上的染料也容易洗下来。而冰乙酸是固定蛋白的，防止蛋白扩散。

我在SDS胶脱色时干过一件很傻的事，把缓冲液当成脱色液摇了一夜，然后第二天来啥条带都没了。

还好，重新染色-脱色，条带又有了
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-09-09 13:56:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bubingwu

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我是先在37℃加上IPTG，然后就降到16℃表达，没有必要先降到16℃在加啊，你老师可能认为高温不利于表达，但是37℃不会对IPTG造成什么影响啊，所以我是在37℃加IPTG，然后在放到16℃下表达，没有问题啊，表达的很好啊！
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-09-10 21:41:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by bubingwu at 2011-09-10 21:41:59:
我是先在37℃加上IPTG，然后就降到16℃表达，没有必要先降到16℃在加啊，你老师可能认为高温不利于表达，但是37℃不会对IPTG造成什么影响啊，所以我是在37℃加IPTG，然后在放到16℃下表达，没有问题啊，表达的很好 ...

恩 我也这么做的 想法一样 谢谢
赞一下 回复此楼
12楼2011-09-10 21:46:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
雪戎6楼
2011-09-08 20:35   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 loveskyzhou 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭