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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)


[交流] 关于大肠表达纯化过程中的两个小问题

首先是诱导的时候(我们是16度),老师总让温度稳稳的降到了16度再加IPTG,培养基热一点都不行,这是为什么啊,我感觉只要后边诱导表达过程温度控制好就行啊= =
还有就是蛋白胶脱色液里的乙酸和乙醇分别起什么作用啊,简单介绍下就行
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btx362237729

金虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
为什么我们做诱导从来没降低温度到16呢。。。。。
9楼2011-09-09 12:40:09
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查看全部 12 个回答

shuihaizi

金虫 (小有名气)


★ ★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-09-08 22:12:09
诱导的温度没有那么严格的,37度培养完,直接加IPTG再放到16度摇就行。至于第二个问题我不清楚。
2楼2011-09-07 16:27:38
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★ ★ ★ ★ ★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+4, MolEPI+1): Good 2011-09-08 22:12:19
加乙醇或者甲醇是为了更容易洗脱考马斯亮蓝,加得越多洗脱越容易,结合在蛋白上的染料也容易洗下来。而冰乙酸是固定蛋白的,防止蛋白扩散。
3楼2011-09-07 21:25:12
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★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
估计导师是怕你摇过头,IPTG的诱导效果不好。其实没那么严格啦。稍微凉到室温差不多也就可以了
4楼2011-09-08 14:50:42
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